Режиссер клипов МакSим Вадим Шатров умер от коронавируса — Газета.Ru
Режиссер клипов МакSим Вадим Шатров умер от коронавируса — Газета.Ru | НовостиОпубликована милая рождественская записка Елизаветы II принцу Уильяму 11:03
Россияне смогут пройти курсы Skillbox с помощью учебного симулятора 11:02
Дочь Табакова и Зудиной назвала любимые фильмы с участием родителей 11:01
Дума Томской области отменила прямые выборы мэра Томска 11:01
Власти ДНР заявили об уничтожении плацдарма ВСУ 11:01
Директор «Роснефти» Сечин: введение потолка цен на нефть и газ отменяет… 10:59
Сечин допустил рост мирового дефицита энергии в семь раз к 2030 году 10:58
Житель Омска подозревается в сексуальном насилии над своими малолетними детьми 10:57
Восковую фигуру Канье Уэста убрали из музея мадам Тюссо 10:55
Во Всероссийской федерации волейбола считают, что у России остаются шансы попасть… 10:54
close
100%
Режиссер клипов певицы МакSим Вадим Шатров скончался от коронавируса, пишет «СтарХит» со ссылкой на супругу режиссера Жанну Карабалаеву.
Карабалаева также больна коронавирусной инфекцией. По ее словам, Шатров скончался в ночь на 29 июня с поражением легких в 55%. «Ковид пришел в мою семью и забрал у нас с Софи Вадима! Я ни разу в жизни не была в такой ситуации. Как себя вести и что делать, не понимаю. Я лежу дома с пневмонией, рядом дочь Софи», — написала в социальных сетях Карабалаева, попросив о помощи и совете при организации похорон.
Вадиму Шатрову было 45 лет. Последней его работой стал клип для певицы МакSим «Спасибо».
Сейчас МакSим госпитализирована с пневмонией, ее ввели в искусственную кому для искусственной вентиляции легких. Шатров был госпитализирован с коронавирусом задолго до болезни МакSим.
Ранее представительница МакSим Яна Богушевская рассказала
«Газете.Ru» о текущем состоянии певицы.Подписывайтесь на «Газету.Ru» в Новостях, Дзен и Telegram.
Чтобы сообщить об ошибке, выделите текст и нажмите Ctrl+Enter
Новости
Дзен
Telegram
Картина дня
Военная операция ВС РФ на Украине.
День 246-й
Онлайн-трансляция военной спецоперации РФ на Украине — 246-й день
«Законная цель для удара». Россия хочет оставить ВСУ без Starlink
В МИД России заявили, что используемые Киевом спутники США могут стать целью для удара
Собчак уехала из России, ее директора отправили в СИЗО
RT: Ксения Собчак подозревается в вымогательстве крупной суммы денег
Медведев назвал Украину «разменной монетой в большой американской игре»
Москвичи могут сделать прививку от COVID-19 назальной вакциной «Спутник»
Стало известно, как Собчак смогла въехать в Литву
Губернатор Севастополя Развожаев сообщил об атаке беспилотника на Балаклавскую ТЭС
Новости и материалы
Дане Милохину грозит крупный штраф за уход из «Ледникового периода»
Рогов: наступление ВСУ на Запорожскую область может начаться до зимы
Премьер Баварии призвал Запад к поставкам оружия Киеву и поиску дипломатического решения конфликта
Опубликована милая рождественская записка Елизаветы II принцу Уильяму
Россияне смогут пройти курсы Skillbox с помощью учебного симулятора
Дочь Табакова и Зудиной назвала любимые фильмы с участием родителей
Дума Томской области отменила прямые выборы мэра Томска
Власти ДНР заявили об уничтожении плацдарма ВСУ
Директор «Роснефти» Сечин: введение потолка цен на нефть и газ отменяет права стран на них
Сечин допустил рост мирового дефицита энергии в семь раз к 2030 году
Житель Омска подозревается в сексуальном насилии над своими малолетними детьми
Восковую фигуру Канье Уэста убрали из музея мадам Тюссо
Во Всероссийской федерации волейбола считают, что у России остаются шансы попасть на ОИ-2024
Джигурда и Волочкова показали танец «для сексуальных утех» на шоу Ивлеевой
Жена Игоря Николаева поздравила его дочь от первого брака с 44-летием
Депутат Верховной рады Железняк: в бюджет Украины с 24 февраля поступило $20 млрд
В Балакове на территории заброшенного здания нашли тело мужчины
Мишустин назвал энергосистему России одной из самых надежных в мире
Все новости
Российские ученые оценили новые доказательства искусственности коронавируса
Найдена статья с инструкцией по созданию коронавируса за 2014 год
Дмитрий Самойлов
Вбойко шагает трансгуманизм
О последнем романе Виктора Пелевина
Тест: угадайте, это любовное письмо классика или шаблон из интернета
Толстой, Ахматова или безымянный составитель признаний в любви?
США ввели санкции против Жасмин и ее мужа.
За что?
США внесли в санкционный список певицу Жасмин и ее супруга политика Илана Шора
Добровольцы получат статус военнослужащих. Что это значит
Госдума одобрила во втором чтении поправки о статусе добровольческих формирований
«Кабинет редкостей Гильермо дель Торо»: лавкрафтовский сериал от лучших хоррор-режиссеров
Вышел сериал «Кабинет редкостей Гильермо дель Торо»
Раз в 18 лет. Как выглядело частное затмение Солнца в разных странах
«Аврора» Романа Волобуева: Лена Тронина из «Happy End» теряет память и рассудок
Рецензия на сериал Романа Волобуева «Аврора» со звездой «Happy End» Леной Трониной
Ответная ядерная атака: что известно о российских учениях, которыми руководил Путин
Шойгу: Путин руководит тренировкой по нанесению ответного ядерного удара
«Она через Белоруссию уехала в Литву». Что известно об обыске в доме Собчак
Следователи провели обыск в подмосковном доме Собчак по делу ее коммерческого директора
Mercedes-Benz уходит из России
Активы Mercedes-Benz в РФ покупает дилерский холдинг «Автодом»
«Брела в сторону моря, выглядела рассеянной». Туристка из России погибла в Таиланде
Генконсул России Соснов сообщил, что найдено тело россиянки, пропавшей 20 октября на Пхукете
«Крах экономики».
В Госдуме не верят в жизнеспособность Украины
Володин заявил, что Украина стала колонией США и не может существовать как государство
Дмитрий Самойлов
Вбойко шагает трансгуманизм
О последнем романе Виктора Пелевина
Юрий Мурадян
Долой самозванца!
О том, как не обесценивать свои успехи
Андрей Колесников
Ностальгия по жертвоприношению
О прецеденте спасения мира
Георгий Бовт
Не сможем повторить
К 60-летию Карибского кризиса
Алена Солнцева
Плакать нельзя, бить можно
О семейном насилии и стереотипах отечественного воспитания
—>
Читайте также
Найдена ошибка?
Закрыть
Спасибо за ваше сообщение, мы скоро все поправим.
Продолжить чтение
«Поражение легких 55%». Умер режиссёр клипов МакSим Вадим Шатров — 29 июня 2021
Общество
29 июня 2021, 17:50
7 комментариевОт последствий коронавируса скончался режиссёр клипов певицы МакSим Вадим Шатров. Об этом 29 июня сообщила в Facebook его супруга, режиссёр Жанна Карабалаева.
«Сегодня под утро умер мой муж Вадим. Поражение легких 55%. Друзья. Я нахожусь в непонятной для меня ситуации… Ковид пришёл в мою семью и забрал у нас с Софи Вадима! Я ни разу в жизни не была в такой ситуации. Как себя вести и что делать, не понимаю», — написала она.
Карабалаева добавила, что лежит дома с пневмонией.
«Пишите только конкретно, что мне делать, приму любую помощь, любой совет. Я обязательно буду держать вас в курсе дела, что и как происходит.
Буду благодарна любому конкретному опыту.., т.к. надо ДЕЛАТЬ. Для меня стоит сейчас вопрос: «ЧТО????»», — добавила вдова.
Шатров сделал последнюю запись в Facebook в ночь на 26 июня, в которой он рассказал о смерти своего соседа по палате.
Шатров также сотрудничал с Димой Биланом, Борисом Гребенщиковым, «Мельницей» и другими.
Певицу МакSим госпитализировали с коронавирусом 15 июня, после концерта в Казани. В настоящее время девушка находится в искусственной коме.
По теме
- Певицу МакSим выписали из больницы. Она продолжит лечение дома
13 августа 2021, 15:15
- «Всем привет, я снова с вами». Певица МакSим опубликовала первый пост после выхода из комы
09 августа 2021, 14:47
- МакSим только начала осознавать, что была в коме
04 августа 2021, 07:22
- «Дышит самостоятельно». Состояние певицы МакSим улучшилось, но её ждёт долгий этап восстановления
03 августа 2021, 14:21
- Певица МакSим восстанавливается после коронавируса.
Сейчас она в сознании03 августа 2021, 12:03
- «Иногда бывает в сознании». Менеджер МакSим рассказала об улучшающемся состоянии артистки
26 июля 2021, 16:35
- Есть улучшения и проблемы с лёгкими. Представитель МакSим рассказала о состоянии певицы
23 июля 2021, 23:45
- Представители MакSим назвали состояние пациентки стабильно тяжелым и не стали подтверждать отказ легкого
17 июля 2021, 18:44
- Умер бывший муж Аллы Пугачёвой кинорежиссёр Александр Стефанович
14 июля 2021, 00:16
- «Всё на нём держалось». В Петербурге от последствий коронавируса умер директор организации, работавшей с трудными подростками
11 июля 2021, 23:42
- Умер режиссер «Супермена» и «Смертельного оружия»
06 июля 2021, 09:06
- Умер режиссер Владимир Меньшов
05 июля 2021, 11:07
- Пётр Мамонов подключён к аппарату ИВЛ
02 июля 2021, 09:34
- «Прости, солнышко»: 10-летняя девочка умерла от старости
02 июля 2021, 09:19
- Актриса Любовь Омельченко скончалась из-за ковида
02 июля 2021, 07:47
- Скончалась драматург Ксения Драгунская
01 июля 2021, 16:39
- Умер актёр, сыгравший в «Улицах разбитых фонарей»
25 июня 2021, 10:57
- «Отец» петербургской дамбы Юрий Севенард умер от коронавируса в Подмосковье
24 июня 2021, 18:22
- Председатель Морского собрания Петербурга скончался в Военно-медицинской академии
22 июня 2021, 11:38
- Умер петербургский журналист Александр Кузьмин
21 июня 2021, 15:16
- «Спартак» вызвался помочь певице МакSим, находящейся в коме
20 июня 2021, 16:29
- Певицу МакSим подключили к аппарату ИВЛ, у неё поражены 40% лёгких
19 июня 2021, 13:15
- Писатель Слава Сэ скончался в больнице, куда попал с тяжелейшей формой коронавируса
19 июня 2021, 13:05
- В Коммунарке от коронавируса скончался следователь по делу ЮКОСа
15 июня 2021, 23:57
Сейчас она в сознанииУДИВЛЕНИЕ1
ПЕЧАЛЬ5
Комментарии 7
читать все комментариидобавить комментарийПРИСОЕДИНИТЬСЯ
Самые яркие фото и видео дня — в наших группах в социальных сетях
- ВКонтакте
- Телеграм
- Яндекс. Дзен
ДзенУвидели опечатку? Выделите фрагмент и нажмите Ctrl+Enter
Новости СМИ2
сообщить новость
Отправьте свою новость в редакцию, расскажите о проблеме или подкиньте тему для публикации. Сюда же загружайте ваше видео и фото.
- Группа вконтакте
Новости компаний
Комментарии7
Новости компаний
МегаФон подготовил сеть к зимним погружениям на полярном круге
Специалисты компании модернизировали объекты связи к началу сезона подлёдных погружений на Белом море в старинной карельской деревне Нильмогуба, где расположен популярный дайв-центр. Теперь как туристы, так и местные жители смогут пользоваться услугами единственного мобильного оператора в локации на скорости до 50 Мбит/с. В результате апгрейда технической инфраструктуры в диапазоне LTE 1800 абонентам компании стали доступны не только преимущества быстрого интернета, но и высокое качество звонков в VoLTE — технология позволяет звонить и.
..
Расстояние — не преграда. Как порадовать посылкой друзей и родных в странах СНГ
Родные, близкие и любимые по разным причинам могут находиться далеко. Телефоны и мессенджеры, конечно, помогают не чувствовать расстояния, но лучше любых разговоров и приветов нечто осязаемое — посылка. Вместо множества слов отправляйте посылки — как милые сердцу подарки и безделушки, так и незаменимые и полезные вещи. Так те, кто далеко от вас, почувствуют, что вы рядом. Ваш адресат находится за границей? Не проблема. С доставкой в СНГ поможет Boxberry*. Отправление с Boxberry — это удобно и легко. У компании широкая сеть отделений, а…
Бренд одежды петербургских дизайнеров GRIOL открывает новый магазин
26 Октября на Московском д. 197 состоится торжественное открытие нового магазина женской одежды GRIOL.
Бренд основан в 1999 г. Это семейная история, которая объединила несколько поколений для создания комфортной, актуальной и доступной одежды для женщин. Лекала разрабатываются с учётом особенностей женской фигуры, поэтому идеально подходят для составления образов девушкам с формами. Размерный ряд коллекций от 44 до 58. Изделия создаются на собственном производстве в Петербурге и Выборге. В приоритете — высокое качество и премиальные…
ТОП 5
1Смольный назвал 7 мест, куда будут эвакуировать во время чрезвычайной ситуации
317 586
1572ТАСС: Собчак подозревают в особо крупном вымогательстве у сотрудника «Ростеха»
245 586
413Михаил Зыгарь* объявил о том, что вышел замуж
89 728
604Наручники или миллион. ФСБ Петербурга задержала подполковника полиции в его день рождения
83 559
205Петербург увидит солнечное затмение.
Объясняем технику безопасности для зрителей
76 959
8Новости компаний
Окисленный липопротеин низкой плотности (окЛПНП) запускает накопление гипоксически-индуцируемого фактора-1α (HIF-1α) посредством окислительно-восстановительных механизмов | Кровь
Пропустить пункт назначения
ГЕМОСТАЗ, ТРОМБОЗ И СОСУДИСТАЯ БИОЛОГИЯ| 15 июня 2003 г.
Краткий отчет
Сумбаев Вадим Владимирович,
Цзе Чжоу,
Бернхард Брюне
Кровь (2003) 101 (12): 4847–4849.
https://doi.org/10.1182/blood-2002-09-2711
История статьи
Сдано:
5 сентября 2002 г.
Принято:
3 февраля 2003 г.
- Разделенный экран
- Делиться
- Твиттер
- Инструменты
Запросить разрешения
Иконка Цитировать Цитировать
- Поиск по сайту
Цитирование
Владимир А. Шатров, Вадим В. Сумбаев, Цзе Чжоу, Бернхард Брюне; Окисленный липопротеин низкой плотности (oxLDL) запускает накопление гипоксически-индуцируемого фактора-1α (HIF-1α) посредством окислительно-восстановительных механизмов.
Кровь 2003; 101 (12): 4847–4849. doi: https://doi.org/10.1182/blood-2002-09-2711
Скачать файл цитирования:
- Рис (Зотеро)
- Менеджер ссылок
- EasyBib
- Подставки для книг
- Менделей
- Бумаги
- КонецПримечание
- РефВоркс
- Бибтекс
Окисленные липопротеины низкой плотности (окЛПНП) и макрофаги играют центральную роль в развитии атеросклероза. Здесь мы получили доказательства того, что oxLDL индуцирует накопление белка, индуцируемого гипоксией, фактора-1α (HIF-1α) в макрофагах человека (Mono-Mac-6) в условиях нормоксии. Накопление HIF-1α было ослаблено предварительной обработкой антиоксидантом N-ацетил-L-цистеином (NAC), донором оксида азота (NO) S-нитрозоглутатионом (GSNO) и ингибиторами никотинамидадениндинуклеотидфосфата (NADPH) оксидазы, такими как дифенилендиодоний.
DPI) или 4-(2-аминоэтил)-бензолсульфонилфторид (AEBSF), что указывает на вклад активных форм кислорода (АФК), генерируемых oxLDL. В то время как oxLDL не модулирует уровни мРНК HIF-1α, эксперименты с циклогексимидом указывали на трансляционный механизм действия oxLDL. Анализ HIF-1-зависимого репортерного гена люциферазы подчеркнул трансактивацию HIF-1. Наши результаты показывают, что oxLDL индуцируют накопление HIF-1α и HIF-1-зависимую активацию репортерного гена в макрофагах человека посредством редокс-опосредованного пути. Это открытие может свидетельствовать о роли HIF-1 в патогенезе атеросклероза и оксЛНП.
Темы:
Краткие сообщения, экспрессия гена, Гемостаз, тромбоз и сосудистая биология, Фагоциты
Темы:
гипоксия, липопротеины низкой плотности, Снижение окисления, инфекционный мононуклеоз, люциферазы, рнк, посланник, циклогексимид, s-нитрозоглутатион, атеросклероз, провоцирующие факторы
Окислительно модифицированный липопротеин низкой плотности (оксЛПНП) появился как патогенетический фактор атеросклероза.
1 Накапливаются данные об окислительном стрессе при сосудистой дисфункции/атерогенезе и значительном вкладе макрофагов в поглощение оксЛПНП, образование пенистых клеток и прогрессирование заболевания. 1 Рассматривая роль оксидаз никотинамидадениндинуклеотидфосфата (НАДФН) в образовании (активных форм кислорода) АФК, мы недавно продемонстрировали, что НАДФН-оксидаза является основным источником АФК в ответ на оксЛПНП, а также предположили, что дифенилендиодоний (ДФИ) ингибитор НАДФН-оксидазы устранял образование АФК в макрофагах. 2
Гипоксия-индуцируемый фактор-1 (HIF-1) представляет собой гетеродимерный фактор транскрипции, состоящий из α- и β-субъединиц. 3 Хотя HIF-1β конститутивно экспрессируется во многих типах клеток, HIF-1α присутствует в неопределяемых количествах при нормоксии из-за быстрой протеосомной деградации и стабилизируется при гипоксии. 4,5 После гетеродимеризации HIF-1α/HIF-1β и транслокации в ядро связывание с промотор-специфическими сайтами HRE (элемент ответа на гипоксию) управляет классическими генами, чувствительными к гипоксии.
6,7 Исследования показали, что АФК обеспечивают окислительно-восстановительный сигнал для гипоксической индукции HIF-1. 8 Более того, АФК, по-видимому, регулируют HIF-1 в условиях нормоксии. В некоторых типах клеток повышенная продукция АФК связана с активацией HIF-1 гормонами, факторами роста и переходными металлами. 8,9 Кроме того, прямое воздействие АФК на клетки может стабилизировать HIF-1α и способствовать экспрессии фактора роста эндотелия сосудов (VEGF). 8,10 Вдоль этой линии цитокин-опосредованная регуляция HIF-1 может потребовать негипоксического, но чувствительного к АФК пути. 11
Здесь мы показали, что oxLDL провоцируют накопление HIF-1α и HIF-1-зависимую активацию транскрипции в макрофагах Mono-Mac-6 (MM6) человека посредством АФК-зависимого пути.
Культуры клеток
Клетки MM6 выращивали в среде RPMI 1640 с добавлением 10 % термоинактивированной эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мМ L-глутамина, 1 % заменимых аминокислот, 1 мМ пирувата натрия, 9 мкг/мл бычьего инсулина и антибиотиков в увлажненная атмосфера 5% CO 2 при 37°C.
Клеточные блюда от 80% до 90% слияния подвергались воздействию нативных липопротеинов низкой плотности (нЛПНП), окЛНП и/или ингибиторов. Клетки RCC4, которые конститутивно экспрессируют HIF-1α, были любезно предоставлены профессором Рэтклиффом, Центр генетики человека Wellcome Trust, Оксфордский университет, Соединенное Королевство. 12,13 нЛНП были приобретены у Sigma (Тауфкирхен, Германия) и окислены, как описано. 2
Вестерн-блот-анализ
HIF-1α (антитело от Becton Dickinson, Heidelberg, Germany), а также актин (для подтверждения равной загрузки белка) определяли вестерн-анализом, как описано. 14
Транзиторная трансфекция
Клетки MM6 (5 × 10 5 ) высевали в чашки диаметром 6 см за 1 день до трансфекции 3 мкг плазмиды pGL3-EPO-HRE-SV40-LUC, содержащей 3 копии элемент, реагирующий на гипоксию эритропоэтина, перед промотором SV 40 или репортерной плазмидой VEGF (pGL3-1,5kbVEGFprom, получен от профессора Мэти, Медицинский центр Университета Пенсильвании, Филадельфия), в течение 8 часов с использованием диолеоил-1,2-диацил-3 -триметиламмоний-пропан (DOTAP) для трансфекции в соответствии с инструкциями компании.
После этого среду меняли и клетки стимулировали.
RT-PCR
Клетки MM6 (5 × 10 6 ) инкубировали с или без 200 мкг/мл oxLDL в течение 5 часов. Суммарную РНК выделяли с использованием набора peqGOLD RNAPure с последующей полимеразной цепной реакцией с обратной транскриптазой мРНК HIF-1α (ОТ-ПЦР). Выбор праймеров был следующим: HIF-1α,5′-CTCAAAGTCGGACAGCCTCA-3′,5′-CCCTGCAGTAGGTTTCTGCT-3′; актин, 5′-TGACGGGGTCACCCACACTGTGCCCATCTA-3′, 5′-CTAGAAGCATTTGCGGTCGACGATGGAGGG-3′. Программа амплификации была следующей: 95°С, 30 секунд; 56°С, 30 секунд; 72°С, 1 минута; 20 циклов; 72°С, 10 минут. Продукты разделяли на 2% агарозных гелях и визуализировали бромистым этидием.
Статистический анализ
Каждый эксперимент был проведен не менее 3 раз, представлены репрезентативные данные. Данные представлены как среднее значение ± стандартное отклонение. Непарный критерий Стьюдента t использовали для оценки значимости различий между группами, принимая P < 0,05 в качестве уровня значимости.
Для изучения влияния oxLDL на накопление HIF-1α клетки MM6 обрабатывали oxLDL или nLDL. Как показано на рисунке 1А, oxLDL дозозависимо (25-200 мкг/мл) индуцировал накопление HIF-1α. oxLDL был получен CuSO 4 /Протокол окисления ЭДТА. Поэтому мы исключили, что ни CuSO 4 , ни ЭДТА в соответствующих концентрациях не способствовали накоплению HIF-1α (рис. 1А). В качестве положительного контроля, чтобы однозначно локализовать HIF-1α, мы использовали лизат белка RCC4 с конститутивной экспрессией HIF-1α (рис. 1А). Кроме того, мы установили, что oxLDL, но не nLDL, индуцируют накопление HIF-1α (рис. 1B). Наиболее эффективный ответ был отмечен между 4 и 8 часами. В этих экспериментальных условиях oxLDL был нетоксичен (данные не представлены).
Рисунок 1.
Просмотреть в большом формате Загрузить PPT
Накопление HIF-1α в ответ на oxLDL. (A) Клетки MM6 обрабатывали возрастающими концентрациями oxLDL в течение 8 часов. Для контроля параллельно обрабатывали 2 мкМ CuSO 4 , 15 мкМ EDTA (этилендиаминтетрауксусная кислота) и лизат клеток RCC4.
(B) Клетки MM6 стимулировали в зависимости от времени с помощью 200 мкг/мл oxLDL или nLDL. (C) Клетки MM6 предварительно обрабатывали 3 мМ NAC, 30 мкМ DPI и 1 мМ 4-(2-аминоэтил)бензолсульфонилфторида (AEBSF) в течение 2 часов с последующей стимуляцией 200 мкг/мл oxLDL в течение 8 часов. S-нитрозоглутатион (GSNO; 1 мМ) вводили вместе с oxLDL в течение 8 часов. (D) Клетки предварительно обрабатывали 30 мкМ PD9.8059 или 30 мкМ SB203580 в течение 2 часов с последующей стимуляцией 200 мкМ oxLDL в течение 8 часов. (E) Экспрессию HIF-1α индуцировали путем воздействия на клетки MM6 200 мкг/мл oxLDL в течение 8 часов. Циклогексимид (CHX) в конечной концентрации 10 мкг/мл добавляли в течение указанного времени (15-60 минут). (F) Клетки обрабатывали 200 мкг/мл oxLDL в течение 5 часов, после чего проводили анализ мРНК HIF-1α с помощью ОТ-ПЦР, как описано. Все эксперименты проводились не менее 3 раз, и показаны репрезентативные данные. Белок HIF-1α был обнаружен с помощью вестерн-блоттинга, как указано в разделе «Дизайн исследования».
Рисунок 1.
Просмотреть в большом формате Загрузить PPT
Накопление HIF-1α в ответ на oxLDL. (A) Клетки MM6 обрабатывали возрастающими концентрациями oxLDL в течение 8 часов. Для контроля параллельно обрабатывали 2 мкМ CuSO 4 , 15 мкМ EDTA (этилендиаминтетрауксусная кислота) и лизат клеток RCC4. (B) Клетки MM6 стимулировали в зависимости от времени с помощью 200 мкг/мл oxLDL или nLDL. (C) Клетки MM6 предварительно обрабатывали 3 мМ NAC, 30 мкМ DPI и 1 мМ 4-(2-аминоэтил)бензолсульфонилфторида (AEBSF) в течение 2 часов с последующей стимуляцией 200 мкг/мл oxLDL в течение 8 часов. S-нитрозоглутатион (GSNO; 1 мМ) вводили вместе с oxLDL в течение 8 часов. (D) Клетки предварительно обрабатывали 30 мкМ PD9.8059 или 30 мкМ SB203580 в течение 2 часов с последующей стимуляцией 200 мкМ oxLDL в течение 8 часов. (E) Экспрессию HIF-1α индуцировали путем воздействия на клетки MM6 200 мкг/мл oxLDL в течение 8 часов. Циклогексимид (CHX) в конечной концентрации 10 мкг/мл добавляли в течение указанного времени (15-60 минут).
(F) Клетки обрабатывали 200 мкг/мл oxLDL в течение 5 часов, после чего проводили анализ мРНК HIF-1α с помощью ОТ-ПЦР, как описано. Все эксперименты проводились не менее 3 раз, и показаны репрезентативные данные. Белок HIF-1α был обнаружен с помощью вестерн-блоттинга, как указано в разделе «Дизайн исследования».
Близкий модальный
Сообщения нескольких групп предполагают, что АФК стабилизирует HIF-1α и активирует HIF-1. 8-10 Поэтому мы исследовали, способствуют ли АФК, продуцируемые в ответ на оксЛНП, накоплению HIF-1α (рис. 1С). N-ацетил-L-цистеин (NAC) является антиоксидантом, который, как известно, снижает АФК. Добавление 3 мМ NAC к клеткам ММ6 за 2 часа до стимуляции 200 мкг/мл oxLDL в течение 8 часов полностью блокировало накопление HIF-1α. DPI ингибирует опосредованное oxLDL образование ROS в макрофагах, блокируя НАДФН-оксидазу. 9{-}\)
может играть роль в индуцированном oxLDL накоплении HIF-1α.
Ранее было продемонстрировано, что члены семейства митоген-активируемых протеинкиназ (MAPK), такие как p38 или ERK1/2, ослабляют трансактивацию HIF-1α в гипоксических клетках. В клетках MM6 ни p38 (SB203580), ни ингибиторы ERK (PD98059) не влияют на индуцированное oxLDL накопление HIF-1α (рис. 1D). Оба ингибитора существенно не изменяли трансактивацию HIF-1 в ответ на oxLDL (данные не показаны). Затем мы исследовали зависящее от времени исчезновение HIF-1α в присутствии ингибитора трансляции циклогексимида (рис. 1E). Клетки обрабатывали oxLDL в течение 4 часов с последующим добавлением циклогексимида вместо носителя в течение 15-60 минут. Циклогексимид снижал экспрессию HIF-1α, начиная с 15-й минуты, что свидетельствует о том, что oxLDL повышали уровень HIF-1α за счет трансляционного механизма. Сохранение обнаруживаемого белка HIF-1α через 15 минут после обработки циклогексимидом может свидетельствовать о задержке начала эффекта циклогексимида, но подразумевает, что способ действия oxLDL оставляет путь деградации в значительной степени нетронутым.
Таким образом, было рекомендовано исследовать экспрессию мРНК HIF-1α. RT-PCR (рис. 1F) показала, что oxLDL не изменяет уровни мРНК HIF-1α. Затем мы проверили способность oxLDL активировать конструкцию репортерного гена HIF-1-зависимой люциферазы, содержащую 3 копии элемента реакции на гипоксию, полученного из гена эритропоэтина человека.
Обработка клеток MM6 oxLDL приводила к значительной активации репортерного гена, которая в значительной степени отменялась DPI (фиг. 2A). nLDL не показал репортерного сигнала, тогда как гипоксия вызывала активность люциферазы, сравнимую с oxLDL. Аналогично, обработка клеток oxLDL приводила к увеличению активности промотора VEGF (рис. 2В). Наши результаты согласуются с предыдущими исследованиями, показывающими 2–3-кратное увеличение репортерной активности при гипоксии 14,15 , и дальнейшими исследованиями, сообщающими о гипоксической продукции VEGF в макрофагах. 16 Атеросклероз — прогрессирующее заболевание и частая причина заболеваемости и смертности в западном мире.
Таким образом, наши результаты по накоплению HIF-1α oxLDL представляются клинически значимыми. Хорошо известно, что HIF-1α играет основную роль в экспрессии VEGF и ангиогенезе 9 , при этом считается, что VEGF опосредует важные изменения, связанные с атерогенезом и ангиогенной активностью макрофагов. 16 Недавние данные свидетельствуют о том, что неоваскуляризация в атеросклеротических бляшках является признаком прогрессирующего атеросклероза/рестеноза. 17 Заманчиво предположить, что накопление HIF-1α, индуцированное oxLDL, и активация VEGF играют важную роль в этих патофизиологических условиях. Появился ряд молекул и молекулярных путей, которые способствуют патогенезу и прогрессированию как атеросклероза, так и рака. 18,19 HIF-1 может быть добавлен к этому списку, учитывая важную ангиогенную роль HIF-1α в опухолях. Наши наблюдения предполагают новое сигнальное качество oxLDL в накоплении HIF-1 и демонстрируют участие ROS. Это представляется очень важным для полного понимания прогрессирования атеросклероза и ремоделирования артериальной стенки под действием oxLDL.
Рисунок 2.
Просмотреть в большом формате Загрузить PPT
HIF-1-зависимая активация репортерного гена с помощью oxLDL. Клетки MM6 временно трансфицировали конструкцией репортерного гена люциферазы, содержащей (A) 3 копии HRE гена эритропоэтина (pGL3-EPO-HRE-SV40-LUC) или (B) pGL3-1,5kbVEGFprom. Трансфицированные клетки стимулировали в течение 8 часов 200 мкг/мл oxLDL или nLDL в отсутствие или в присутствии 30 мкМ DPI или подвергали воздействию гипоксии (1% кислорода) в течение 8 часов с последующим определением активности люциферазы. Активность люциферазы выражена относительно контроля, принятого за 100%. Значения представляют собой кратность индукции 4 независимых экспериментов.
Рисунок 2.
Просмотреть в большом формате Загрузить PPT
HIF-1-зависимая активация репортерного гена с помощью oxLDL. Клетки MM6 временно трансфицировали конструкцией репортерного гена люциферазы, содержащей (A) 3 копии HRE гена эритропоэтина (pGL3-EPO-HRE-SV40-LUC) или (B) pGL3-1,5kbVEGFprom.
Трансфицированные клетки стимулировали в течение 8 часов 200 мкг/мл oxLDL или nLDL в отсутствие или в присутствии 30 мкМ DPI или подвергали воздействию гипоксии (1% кислорода) в течение 8 часов с последующим определением активности люциферазы. Активность люциферазы выражена относительно контроля, принятого за 100%. Значения представляют собой кратность индукции 4 независимых экспериментов.
Закрытое модальное окно
Предварительно опубликовано онлайн как Blood First Edition Paper, 13 февраля 2003 г.; DOI 10.1182/кровь-2002-09-2711.
При поддержке фондов Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) (BR 999), Европейской комиссии (EC) (QLK 6-GT-2000-64) и VerUm Foundation. В.А.С. является научным сотрудником Фонда Александра фон Гумбольта.
В.А.С. и В.В.С. внесли одинаковый вклад в это исследование.
Затраты на публикацию этой статьи были частично покрыты за счет платы за страницу. Поэтому и исключительно для того, чтобы указать на этот факт, эта статья настоящим помечена как «реклама» в соответствии со статьей 18 U.
S.C. раздел 1734.
1
Стейнберг Д. Окисление липопротеидов низкой плотности и его патобиологическое значение.
J Biol Chem
.
1997
;
272
:
20963
-20966.
2
Fischer B, von Knethen A, Brüne B. Дуализм окисленных липопротеинов в провоцировании и ослаблении окислительного взрыва в макрофагах: роль гамма-рецептора, активируемого пролифератором пероксисом.
Дж Иммунол
.
2002
;
168
:
2828
-2834.
3
Ван Г.
Л., Семенза Г.Л. Очистка и характеристика индуцируемого гипоксией фактора 1.
J Biol Chem
.
1995
;
270
:
1230
-1237.
4
Salceda S, Caro J. Гипоксия-индуцируемый белок фактора 1α (HIF-1α) быстро расщепляется убиквитин-протеасомной системой в нормоксических условиях. Его стабилизация гипоксией зависит от окислительно-восстановительных изменений.
J Биол Хим
.
1997
;
272
:
22642
-22647.
5
Хуан Л.Э., Гу Дж., Шау М., Банн Х.Ф. Регуляция индуцируемого гипоксией фактора 1альфа опосредуется О2-зависимым доменом деградации через убиквитин-протеасомный путь.
Proc Natl Acad Sci U S A
.
1998
;
95
:
7987
-7992.
6
Hellwig-Burgel T, Rutkowski K, Metzen E, Fandrey J, Jelkmann W. Интерлейкин-1β и фактор некроза опухоли-α стимулируют связывание с ДНК фактора-1, индуцируемого гипоксией.
Кровь
.
1999
;
94
:
1561
-1567.
7
Faquin WC, Schneider TJ, Goldberg MA. Влияние воспалительных цитокинов на индуцированную гипоксией продукцию эритропоэтина.
Кровь
.
1992
;
79
:
1987
-1994.
8
Chandel NS, McClintock DS, Feliciano CE, et al. Активные формы кислорода, образующиеся в митохондриальном комплексе III, стабилизируют индуцируемый гипоксией фактор-1α во время гипоксии. Механизм обнаружения O2.
J Biol Chem
.
2000
;
275
:
25130
-25138.
9
Richard DE, Berra E, Pouyssegur J. Негипоксический путь опосредует индукцию индуцируемого гипоксией фактора 1α в гладкомышечных клетках сосудов.
J Биол Хим
.
2001
;
275
:
26765
-26771.
10
Brauchle M, Funk JO, Kind P, Werner S.
Ультрафиолет B и h3O2 являются мощными индукторами экспрессии фактора роста эндотелия сосудов в культивируемых кератиноцитах.
J Biol Chem
.
1996
;
271
:
21793
-21797.
11
Хаддад JJ, Land SC. Негипоксический, чувствительный к АФК путь опосредует TNF-альфа-зависимую регуляцию HIF-1альфа.
FEBS Письмо
.
2001
;
505
:
269
-274.
12
Maxwell PH, Wiesener MS, Chang G-W, et al. Белок-супрессор опухоли VHL нацелен на факторы, индуцируемые гипоксией, для кислородзависимого протеолиза.
Природа
.
1999
;
399
:
271
-275.
13
Wykoff CC, Pugh CW, Maxwell PH, Harris AL, Ratcliffe PJ. Идентификация новых зависимых от гипоксии и независимых генов-мишеней опухолевого супрессора фон Хиппеля-Линдау (VHL) с помощью профилирования дифференциальной экспрессии мРНК.
Онкоген
.
2000
;
19
:
6297
-6305.
14
Sandau KB, Zhou J, Kietzmann T, Brüne B. Регуляция индуцируемого гипоксией фактора 1альфа медиаторами воспаления оксидом азота и фактором некроза опухоли-альфа в отличие от десфероксамина и оксида фениларсина.
J Биол Хим
.
2001
;
276
:
39805
-39811.
15
Майти А., Пор Н., Ли Дж., Соломон Д., О’Рурк Д.М. Рецептор эпидермального фактора роста транскрипционно активирует экспрессию сосудистого эндотелиального фактора роста в клетках глиобластомы человека посредством пути, включающего фосфатидилинозитол-3′-киназу и отличного от пути, индуцируемого гипоксией.
Рак Res
.
2000
;
60
:
5879
-5886.
16
Сюн М., Элсон Г., Легарда Д., Лейбович С.Дж. Производство фактора роста эндотелия сосудов мышиными макрофагами: регуляция гипоксией, лактатом и индуцируемым путем синтазы оксида азота.
Ам Дж. Патол
.
1998
;
153
:
587
-598.
17
Laukkanen J, Ylä-Herttuala S. Гены, вовлеченные в атеросклероз.
Exp Нефрол
.
2002
;
10
:
150
-163.
18
Росс Дж.С., Стальяно Н.Е., Донован М.Дж., Брейтбарт Р.Е., Гинзбург Г.С. Атеросклероз и рак: общие молекулярные пути развития и прогрессирования заболеваний.
Ann NY Acad Sci
.
2001
;
947
:
271
-293.
19
Той М. Бандо Х., Огава Т., Мута М., Хорниг С., Вейх Х.А. Значение отношения фактора роста эндотелия сосудов (VEGF)/растворимого рецептора VEGF-1 при раке молочной железы.
Int J Рак
.
2002
;
98
:
14
-18.
Войдите через свое учреждение
РОЗАЛИЯ — САОКО on Vimeo
Включите JavaScript, чтобы увидеть Vimeo во всей его красе.
Музыкальное видео режиссера Валентина Пети для Розалии «SAOKO» производства Division.
-Производство: Подразделение
-Режиссер: Валентин ПЕТИ
— Продюсер: Тео ГАЛЛ
— Линейный продюсер: Леа ВИЛЛЕН-БАРАШЕ
— Координатор производства: Клеманс ДЕЛАФОНТЭН
— Художник-постановщик: Морган Сейт
— Сервисное производство: FAMILY Production
— Исполнительный продюсер: Никита БУКОВСКИЙ — Продюсер: Марина 9064:
-Ассистент продюсера: Дима ШОПИН
-Координатор производства: Станислав ПРИТУЛА
-Ассистент координатора: Катя ЯНЮК
-Менеджер производства: Виктор ПОМИН
-Менеджер локации: ПАВЛЕ Роман и МАТЮХ Артем
-Casting Manager: Julia GULTAEVA
-Casting Assistant: Sergey PULENETS
-Chaperone: Olya CHERKASSKAYA & Olivia MIROSHNIKOVA
-D.
O.P: Paul GUILHAUME
-1st AD: Aloha KULIESHOVA
-Steadicamer: Sacha NACERI
-Gaffer: Sasha DROZDOV
-1st AC CAM A: Павел ЧУЙ
-1st AC CAM B: Алексей КАЛЬНИЙ
-Focus Puller: Влад ДОБРИК
-Video Assistant: Алексей ГОНЯЙЛО
-Русская рука: FILMOTECHNIC, Антон ЛАПИГА и Тарик МИСКИВ
-SFX: Вадим ТОРНАДО
-Долли: Денис КОРОЛЕВ
-Дрон: ЗОДИАК, Дима ДЕНИСОВ, Александр МАЗУР
-Дрон F.P.V: Бенуа ФИНК
-Гопро: Андрей ГУМЕНЮК
-Художник-постановщик: Владимир ЧЕРЕМЫСЬ )
-Мастер реквизита: Михаил КОШМАК — Координатор
St:
St Андрей ГОЛОВНЯ
-Врач: Максим
-Охранник: Александр КОНОНОВ-Аренда: ПАТРИОТ
-Кейтеринг: ЭНЕРГИЯ кейтеринг
-Спецтранспорт: CARTOCCI & STARWAGEN
-Водители: Вадим Квасницкий, Павел Качкивский, Анатолий Решетников, Александр Удозивиченко.
Стилист Розалии: Хейли Уолленс
Стилист. Помощник: Одри Пети
Розалия Макияж и волосы Художник: Хавьер Гарсия Родригес
Стилист: Павел Баклагин
Ассоциации.
Ассистент визажиста: ТКАЧУК Мария
Прическа: ТВЕЛИНА Лена
Маникюр: ЗАВОРА Оксана
СТЮНТ РАЙДЕРЫ
-Эшли ЛАММЕЛА ( @ashley_lammela )
-Катерина ЯНДОВА ( @katestunt )
-Сара АЙДИН ( @saaraazh )
-Андрей ГОЛОВНЯ ( @andgolovnya ) & Евгений ФЕДЮК ( @fedyukevgenii ) & Дмитрий СОРОКА ( @dima_mikra )
-Анна БОНДАРЕНКО ( @iambondarenkoo )-Яна ВАШУЛЕНКО ( @yas883_ ) АлШЕНЧОНА
@cleopatra6969 )
-Ира НАДЕЕВА (@iraraketa )-Эмма Сердюк (@emmka66 )
GANG RIDERS
-Наталья ПАЛОМАРЕС
-Шейла ОРТЕГА
-Кристина РЕВЕНКО ( @revaaak )6 -NAZAR9mu ___ ПАК ( @__ ( @странный )
-Дарина МАЛЬЦЕВА ( @darina1maltseva )
-Марина КУЩЕВА ( @dnndbdhdhdueuk )
-Антон БОДУНОВ ( @me.bodunov )
-Сергей БАКАНОВ
-Креативный директор: Пили ВИЛА
-Move6AY Креативный директор: Ferran04AY ECHEGAR Шай ЛАТУКОЛАН
МОНУМЕНТАЛЬНЫЙ
-Пост-продюсер: Лайла ХАМДАУИ
-Ассистент пост-продюсера: Саймон Тристан, Янцзюнь Чжоу и Сидни Мулен
-Главные редакторы: Джон ЭЧЕВЕСТ
-Редакторы: Валентин Пети, Антонин Бронес, Хьюго Берон, Уильям Таун , Сабрина Мазн, Эмили Обри
Цветовой градиент: Артур По.