Полина матушкина: «Создание профессиональный команды в Перми – это дело не одного дня» / Ассоциация Студенческого Баскетбола

Автор: | 03.04.2021

Содержание

«Создание профессиональный команды в Перми – это дело не одного дня» / Ассоциация Студенческого Баскетбола

Трехкратная участница Матчей звезд АСБ – об образовании женской профессиональной команды в Перми.

– Создание профессиональный команды в Перми – это дело не одного дня. Мы очень долго к этому шли, и, наконец-то, у нас получилось!

В 2015-м году, когда я впервые приехала в Пермь, здесь был профессиональный баскетбольный клуб «Академия», мы были дебютантами Суперлиги-2.

На протяжении пяти лет я играла в Перми, уже так и не скажешь, что это не мой родной город. У нас был тяжелый путь, но чем труднее подниматься, тем сильнее становишься, так и мы из года в год становимся лучше и сильнее, работая с профессионалами своего дела Владимиром Борисовичем Полуяновым и Евгением Геннадьевичем Сухановым. Сочетание опыта и молодости в нашем тренерском штабе ведет нас к вершинам! Я никогда не сомневалась в правильности выбора команды. Очень рада, что я здесь и именно в этой команде.

Предсезонку мы уже начали. В период режима самоизоляции тренировки проходили по индивидуальным планам, которые составляла нам тренер по ОФП Мария Сергеевна Четверухина. Мы работали над своим телом самостоятельно. Сейчас же уже во всю тренируемся на открытой площадке. Свежий воздух и солнце – прекрасная погода для нашего совершенствования!

Есть игроки, которые уже были на просмотре, некоторых еще нам только предстоит увидеть. Как только будет сформирован состав, пройдут учебно-тренировочные сборы, товарищеские игры. И потом мы вступим в бой! Будет очень интересный сезон, я с нетерпением его жду! Новый вызов – новые возможности!

В Перми объявили о создании женской профессиональной баскетбольной команды

Полина Матушкина: «Мне порой кажется, что я сумасшедшая от любви к баскетболу» - Studentsport.

ru

Полина Матушкина, даже перейдя по ходу сезона в профессиональный спорт, не забывает напоминать о себе и в студенческой среде. Так, недавно она во второй раз подряд была признана самой ценной баскетболисткой

Матча звезд АСБ. Самая результативная студентка последних лет рассказывает о переходе в профи, изменении функций на площадке, студенческой атмосфере, «Политехе» и новом лидере КОР ПК.

— Мы с тобой не общались больше полугода. За это время главное событие в твоей жизни – переход в профессиональный спорт?

— Да, конечно, это большой шаг вперёд в моей карьере! Я же обещала вернуться в профессиональный спорт. Вот, как видишь, держу слово (смеётся). Шанс постучался в двери – и я просто не могла им не воспользоваться.

— На протяжении последних нескольких лет тебя активно отправляли в профи. Почему переход состоялся только сейчас?

— Этому поспособствовало много причин, раскрывать все карты не буду. Все сложилось, как сложилось, и я очень рада, что я оказалась именно в «Нике». Команда с большими амбициями и целями.

— Ты говорила, что тренерский штаб КОР ПК сразу одобрил твой переход в «Нику». Что в первую очередь тренеров привлекло в этой команде?

— Да, все верно, тренеры одобрили это предложение. Получить его – это наша общая заслуга, ведь мы вместе работали над этим, чтобы расти и подниматься выше. Все ведь понимали, что ограничения в возрасте не дадут мне больше играть по АСБ. Команда Суперлиги-1, которая находится на третьей строчке регулярного этапа, также играет по EWBL

(Восточноевропейская женская баскетбольная лига – прим.ред.) Это огромный плюс и колоссальный опыт.

— В первом же своем матче за новую команду ты набрала 20 очков. В последних матчах больше 10 очков закидывать почти не получалось. Почему упала результативность?

— Мне сложно ответить на этот вопрос.

— По сравнению с КОР ПК функции на площадке кардинально поменялись?

— Здесь баскетбол комбинаций и «больших» игроков. Конечно, больше нацелено все на игру вниз. Да и брали меня не под атаку, а на защиту, поэтому стараюсь выкладываться на максимум в защите.

— Вы идете на третьем месте в Суперлиге-1. Выйти в «Премьерку» будет реально по итогам сезона?

— Насчёт Премьер-лиги не могу ничего сказать, но цель стать Чемпионами Суперлиги-1 есть, и она вполне реальная. В «Нике» очень хорошая команда и тренерский штаб.

— Несколько недель назад вы играли против бывших студенток АСБ – «Политеха». Несколько лет ты играла с ними по студентам, сейчас уже сражаешься на паркете по профи. В этом и есть прогресс студенческого баскетбола?

— Очень здорово, когда команда, перерастая студенческий баскетбол, поднимается в профессиональный спорт без привлечения игроков, имеющих опыт выступления в лиге. И при этом достойно выступает на этом уровне. Это, конечно, выше всяких похвал.

Фото: АСБ

— Недавно отгремел Матч звезд АСБ. Было приятно вновь погрузиться в студенческую атмосферу? Знаю, что атмосфера на этом Матче всегда тебя заряжала.

— Да, я очень ждала этого Матча и надеялась, что меня отпустят, ведь все-таки сейчас я нахожусь в профессиональном клубе. К этому отнеслись с пониманием и одобрили мою поездку. Я благодарна тренерскому штабу и руководству, что отпустили меня, ведь я так много отдала студенческому баскетболу, и это было важно для меня.

Атмосфера просто бомбическая, как и всегда! И она заряжает эмоциями ооочень (улыбается).

— Атмосфера же во многом и помогла тебе второй год подряд стать самой ценной баскетболисткой Матча?

— Считаю, за время, которое мне дали провести на площадке, зрителям я смогла подарить зрелищную и красивую игру. Выходя на паркет, я не думала о том, стану ли я самым ценным игроком и целенаправленно этого не добивалась. Мне было очень приятно присутствовать на этом Матче звезд, и я выходила с улыбкой на площадку и просто кайфовала от этой игры. Мне порой кажется, что я сумасшедшая от любви к баскетболу (смеётся).

— «Восток» сильнее «Запада» за счет…?

— Какой интересный вопрос (смеётся). Просто сильнее! Опять же, мое мнение: это сплочённость. У нас не было ни дня, что бы мы вместе не собирались и не пообщались. Каждый день вместе и друг за друга, это очень здорово!

Фото: АСБ

— Сейчас продолжаешь следить за ходом АСБ?

— Конечно, я слежу за АСБ, ведь столько отдала студенческому спорту. Да и команда мне не безразлична, я переживаю за них и поддерживаю.

— Совсем недавно КОР ПК выдал 10-матчевую беспроигрышную серию. Получается, не единой Полиной Матушкиной жила команда?

— Это система! Она позволяет раскрывать игроков. Да и что уж говорить, та же Ксюша Габова всегда наступала мне на пятки. Подрастающее поколение – так и должно быть!

— Она сейчас набирает свыше 30 очков за матч частенько. Ксюша сейчас лидер команды?

— Безусловно. Мы общаемся после каждой игры. Ксюша много советуется со мной, иногда я сама подсказываю что-то по игре. И мне хочется передавать свой опыт и делиться им с тем, у кого по-настоящему горят глаза. Я верю в неё, у неё всё получится!

— На плей-офф Лиги Белова приедешь поболеть за своих?

— Будет возможность – обязательно!

Евгений ДЕРЕВЯНКО
Studentsport.ru

Суперлига-2 пополнится женской командой из Перми – Местное время

Название команды еще не определено, а заявка на участие уже отправлена.

В Перми появится профессиональная баскетбольная женская команда, которая будет представлять Пермский край в третьей лиге России в сезоне 2020/2021, об этом сообщил президент краевой федерации баскетбола Сергей Богуславский.

По словам олимпийской чемпионки по баскетболу Светланы Антиповой, проект должен успешно стартовать сначала в Суперлиге-2, а после этого и в Суперлиге-1. Вершиной может стать участие в женской Премьер-лиге.

— Могу поздравить Пермский край с таким событием, теперь он полноценный баскетбольный регион. Когда есть мужская команда — это замечательно, а когда и женская, то это здорово. Я очень рада этому событию, долго просили создать именно женскую команду, у нас очень богатая история — «Урал-Грейт», «ПАРМА», КЭС-баскет. Для местных молодых игроков важно знать где они смогут играть, зачастую они уезжают в другие регионы. Я считаю, что Пермь — это столица Урала и мы можем выдержать конкуренцию, — рассказала на пресс-конференции экс-баскетболистка и куратор проекта.

Спикеры отметили, что тренерский штаб команды будет состоять из лучших баскетбольных методистов страны — Евгения Суханова (главный тренер колледжа олимпийского резерва), Владимира Полуянова (бывший тренер «Урал-Грейта», ЦСКА и национальной команды) и Андрея Лалетина (также входил в тренерский штаб «Урал-Грейта» и юношеских национальных сборных).

— Команда зарождается не на пустом месте, колледж олимпийского резерва — большая система, объединяющая как юных, так и взрослых воспитанников. В Пермском крае много талантливых баскетболисток, сейчас у них появляется возможность оставаться дома, — отметил наставник Евгений Суханов.

Создатели команды пояснили, что в нее войдут местные воспитанницы, которые являются студентками спортивного колледжа и играют за БК «Академия». Так, в Пермь вернулась одна из лучших баскетболисток студенческой Суперлиги Полина Матушкина. В прошлом сезоне она установила рекорд по результативности.

На данный момент бюджет женского клуба окончательно не сформирован, финансирование будет осуществляться из трех источников — краевого бюджета, бюджета «ПАРМЫ» и спонсорских средств.

Полина Матушкина перешла в команду классом выше


Сергей Онорин, корреспондент

Твитнуть

Поделиться

Поделиться

Отправить

Вотсапнуть

Произошло то, что ещё давно должно было произойти. Защитник пермской баскетбольной команды «Академия» Полина Матушкина, рекордсменка всевозможных достижений пермского клуба и Ассоциации студенческого баскетбола России, на днях приняла приглашение от команды суперлиги «Ника» (Сыктывкар).

Фото: Баскетбольный клуб НИКА Сыктывкар vk.com/basketkomi

Дебют за новую команду у Полины состоялся 12 декабря, когда сыктывкарская «Ника» в рамках чемпионата страны на своей площадке проводила вторую игру с командой «Вологда» (Чеваката). Матушкину успели зарегистрировать прямо в день этой встречи. Полина начала игру в стартовой пятёрке. В итоге «Ника» одержала победу со счётом 89:64, а бывший лидер пермских студенток праздновала свой первый успех в суперлиге. За матч она набрала 20 очков и сделала четыре подбора.

Кстати, женская баскетбольная команда «Ника» является самым авторитетным спортивным брендом в Республике Коми. Эта команда существует с 1969 года. После открытия  Сыктывкарского государственного университета костяк девичьего баскетбольного коллектива составили студентки именно этого вуза. Уже к середине 1970-х команда стала сильнейшей в республике, а в 1987 году завоевала право выступать во второй лиге чемпионата СССР, став первой в отборочном турнире. В те годы попасть в спортивную элиту было чрезвычайно сложно, но в 1991 году сыктывкарские баскетболистки пробились в первую лигу, а в 1998-м — в высшую. В суперлиге «Ника» выступает с 2003 года.

Твитнуть

Поделиться

Поделиться

Отправить

Вотсапнуть

Матушкина совершила массу бомбардирских подвигов в студенческой лиге — Российская газета

Не одной зимней Универсиадой, с успехом проходящей в Красноярске, живет студенческий спорт в нашей стране. Месяц март по традиции является жарким для самого массового в Европе - около 800 (!) команд-участниц - соревнования: чемпионата Ассоциации студенческого баскетбола (АСБ).

Здесь свои интриги и свои герои.

Триумфом пермской "Академии" завершился прошедший в Иваново "Финал восьми" высшего женского дивизиона АСБ - Студенческой суперлиги. В решающем матче девушки из Колледжа олимпийского резерва Пермского края обыграли соперниц из Поволжской государственной академии физической культуры, спорта и туризма (Казань) - 95:83. Полина Матушкина из состава победительниц набрала 56 (!) очков.

И это далеко не единственный бомбардирский подвиг Матушкиной в нынешнем сезоне, поражающей кольцо с такой же точностью и постоянством, словно легендарный баскетболист НБА Майкл Джордан. В 19 проведенных встречах ее средний показатель представляет собой умопомрачительную цифру - 42,4 очка за игру. Причем восемь раз Полина достигала или превосходила гроссмейстерский рубеж в 50 очков. Четырежды ей удавалось совершить десять или более дальних попаданий.

Самым ценным игроком "Финала восьми" признана именно Матушкина. В символическую пятерку вошли: Анна Панченко (Пермь), Анна Гаранина, Мария Панфилова (обе - "Сирены" СПб), Карина Переменина, Елизавета Зайцева (обе - Казань).

Корреспондент "РГ" побеседовал с Полиной Матушкиной, которая сейчас видится почти явным кандидатом в сборную России для участия на летней Универсиаде-2019 в Италии.

Ваши впечатления о "Финале восьми"? Всем ли довольны в своей игре?

Полина Матушкина: Ощущения только самые положительные, поскольку наша команда выиграла в Иваново все три матча и заняла первое место. Причем все встречи складывались напряженно, мы закалили характер, продемонстрировали командный дух. По ходу главного матча с Казанью мы прилично уступали в счете. Но для нашей команды и "минус 10", и даже "минус 15" - не критическое отставание, мы знали, что в итоге выиграем. Вовремя смогли собраться, как надо отработали в защите, совершили много перехватов.

В четвертьфинале вы набрали 54 очка, в решающем матче - 56! Чуть не хватило до личного и абсолютного рекорда АСБ - 58 очков. Откуда такая результативность? Называют вас Джорданом в юбке?

Полина Матушкина: Да, тренеры используют такое сравнение, когда обращаются к другим девчонкам: "Посмотри, как Джордан играет!" Почему много забиваю? На тренировках много работаю над бросками - средними и особенно дальними. Ну и никогда не боюсь брать на себя ответственность при завершении атаки. Плюс тренеры доверяют, часто провожу на площадке все 40 минут чистого времени без замен. Но о своих личных рекордах никогда не думаю.

Расскажите о себе, как пришли в баскетбол, почему выбрали именно студенческую лигу?

Полина Матушкина: Я сама из Челябинска. Когда приехала в Пермь, там была профессиональная команда мастеров, выступавшая в одном из дивизионов чемпионата России. Потом она по разным причинам прекратила существование. Поэтому ничего не оставалось, как сосредоточиться на выступлении в студенческом коллективе.

После такого сезона в АСБ наверняка будут предложения от профессиональных клубов…

Полина Матушкина: В последнее время мне поступали предложения вернуться в профи, но я пока решила остаться в "Академии". У нас очень сильный тренерский штаб, здесь я заметно выросла как игрок и продолжаю расти. И сейчас главные мысли о том, чтобы победить еще и в Лиге Белова - предстоящем всероссийском студенческом плей-офф.

В эти дни в Красноярске проходит зимняя Универсиада. Следите за соревнованиями?

Полина Матушкина: По мере возможности, смотрю прямые трансляции. Причем интересно все, даже не могу назвать какой-то конкретный вид спорта. Ну и, конечно, держу в уме, что летом в Италии пройдет летняя Универсиада, где выступят наши мужская и женская студенческие сборные. Не скрою, очень хочу попасть в команду (согласно договору между АСБ и РФБ в состав баскетбольных сборных на Универсиады войдут реальные игроки-студенты. - Прим. "РГ") и принять участие в этом масштабном соревновании.

Энергия баскетбола. Баскетболистки «Парма-КОР» уже в первом сезоне вышли в плей-офф

Клуб «Парма-КОР» вышел в плей-офф чемпионата России по баскетболу среди женских команд Суперлиги-2. Впервые в истории этого вида спорта команда из Прикамья добилась такого успеха, причем в год своего дебюта. Главный тренер «Пармы-КОР» Евгений Суханов – об идеологии клуба, спортивных результатах и проекте летнего драфта.

Евгений Геннадьевич, клуб «Парма-КОР» создан буквально в прошлом году и проводит первый сезон в Суперлиге. Его регулярная часть завершилась, впереди плей-офф. Как вы оценивает дебют команды на столь высоком уровне?

– Первый сезон – это всегда время проб и ошибок, а нынешний еще более особенный, поскольку covid внес кардинальные коррективы. Формируя команду, мы сразу сделали ставку на своих воспитанниц, отлично провели предсезонную подготовку, приняли участие в розыгрыше Кубка России, где встретились с ведущими командами страны, участниками розыгрыша Евролиги и т.п. Настрой перед стартом в чемпионате был самым оптимистичным, но тут в дело вмешался коронавирус. К карантинным ограничениям добавились еще и болезни игроков – 90% состава переболело, затем в ноябре «зацепило» и меня. В результате адаптация в новом для нас турнире затянулась, но шаг за шагом мы взяли ситуацию под контроль, и январь получился совсем другим. «Парма-КОР» одержала пять побед на финише, выиграла три матча из четырех в сложнейшем сибирском турне. Команда вышла в плей-офф чемпионата, впервые в истории прикамского баскетбола клуб из Перми смог добиться такого успеха.

Вы сказали, что «Парма-КОР» делает ставку на воспитанников пермского баскетбола. Расскажите подробнее о формировании состава.

– Благодаря еще «Урал-Грейту» Пермь на протяжении многих лет – особая точка на карте, своего рода Мекка российского баскетбола. Поэтому органичным стало появление «Пармы» – нового флагмана прикамского баскетбола. А в прошлом сезоне и женского клуба «Парма-КОР».

Очень сложно представить развитие спорта, когда нет ориентира в виде профессионального клуба. Это верх пирамиды, важнейший фактор мотивации для молодых спортсменов, которые видят куда расти, к чему стремиться.

Конечно, количество занимающихся баскетболом парней выше, чем девчонок. Но Пермский край воспитал и воспитывает отличных спортсменок. Посмотрите, наш лидер Полина Матушкина – автор всех мыслимых и немыслимых рекордов в Студенческой Лиге АСБ, уверен, что их не побить никому. Анастасия Домнина – лучший снайпер регулярного чемпионата Суперлиги этого сезона. В этом же ряду Ксения Габова, Яна Цыбина. Все они наши землячки.

5 марта в спорткомплексе «Победа» пройдет первый матч серии плей-офф Чемпионата России среди женских команд Суперлиги-2, «Парма-КОР» встречается с ЖБК «Юность» из Пензы. Начало матча – 18:00. Разрешено присутствие зрителей с соблюдением всех необходимых ограничений.

Как я уже сказал, мы создали полноценную пирамиду для подготовки игроков. В Академии баскетбола, которая работает на базе пермского Колледжа Олимпийского резерва, тренируются более 150 детей. Самому младшему – 4 года, и далее – все возрасты. Кстати, Иван Ухов, начинавший свою профессиональную карьеру в «Парме», а сейчас выступающий за ЦСКА, – также выпускник Колледжа.

Не могу не назвать еще двух очень важных для нас людей. Куратором проекта развития женского баскетбола в Перми является Светлана Александровна Антипова, олимпийская чемпионка, звезда советского и российского спорта. Старший тренер команды «Парма-КОР» Владимир Борисович Полуянов – один из лучших отечественных специалистов, он работал в «Урал-Грейте», а также в ЦСКА, с которым побеждал в Евролиге. Оба они профессионалы с большой буквы.

Какие компании и организации сегодня поддерживают клуб?

– Клуб функционирует на базе Колледжа Олимпийского резерва, и мы очень благодарны его директору Светлане Юрьевне Гончаровой. Важнейший партнер – БК «Парма», который всецело нас поддерживает. Основные коммерческие партнеры – НПО «АэроСфера», «АВС-Авто». Сейчас мы активно ведем переговоры, в ближайшее время этот список обязательно расширится.

5 марта в спорткомплексе «Победа» пройдет первая игра серии плей-офф. Сейчас ограничения смягчены – разрешено присутствие зрителей на трибунах. Можно ли говорить, что у «Пармы-КОР» уже есть свой болельщик?

– Как мы все знаем, коронавирус колоссально повлиял на спортивные соревнования. В какой-то период времени они были полностью отменены, затем игры вернулись, но без возможности зрителям прийти на матчи. Но если оценить реакцию на новости о нашей команде в социальных сетях, то мы видим стабильный интерес к женскому баскетболу. Люди следят за результатами, реагируют на новости, они соскучились по хорошим соревнованиям. Нет сомнения, что мы увидим зрителей и на трибунах.

Понимаете, иногда приходится слышать, что женским видам спорта не хватает зрелищности. Но «Парма-КОР» исповедует активный, энергичный баскетбол. Он никого не оставляет равнодушным.

Перед началом сезона клуб планировал проведение социальных акций, но пандемия не позволила этого сделать. Какие сейчас планы?

– Клуб возвращается ко всем нашим проектам. Мы договорились о сотрудничестве с краевым Социально-реабилитационным центром для несовершеннолетних. Ребята не только будут посещать игры «Пармы-КОР», но также наши тренеры проведут тренировки для воспитанников центра. Заинтересованность большая, этот и другие проекты обязательно будут реализованы. Сейчас обсуждается идея сотрудничества центра и колледжа. Да, воспитанники центра попали в непростую жизненную ситуацию, что называется, оступились. Но это не повод ставить на них крест, баскетбол может стать фундаментом для возвращения к нормальной жизни, полноценным социальным лифтом для ребят. Мы приложим максимум усилий, чтобы помочь им в этом.

Я слышал о планах клуба провести летний драфт для баскетболисток. Расскажите, как это будет организовано, все-таки подобное – редкость для России.

– Действительно, клуб собирается организовать драфт для отбора игроков. Он будет максимально открытым, и буквально любая спортсменка может принять участие и в случае успешного выступления попасть в состав команды. Это уникальная история, но мы решили попробовать. Думаю, многие захотят воспользоваться таким супершансом – оказаться в профессиональном баскетбольном клубе, а мы им обязательно поможем.

Не пропустите:В Перми в 2022 году появится Центр баскетбола23 февраля 2021, 08:30

Фото: пресс-служба клуба «Парма-КОР».

Марина Матушкина ВКонтакте, Екатеринбург, Россия, id19514689

Марина Матушкина. ТАНЦОР | ХОРЕОГРАФ | РЕЖИССЕР
Приветствую вас, дорогие подписчики! Если вы зашли сюда, значит вы интересуетесь одним из самых прекрасных видов искусства - танцем! Здесь вы узнаете как сделать свою жизнь еще ярче, танцуя! Я буду делиться с вами ПРАКТИЧЕСКИМИ советами о занятиях танцами. Я обожаю танцы! Практически училась ходить и танцевать одновременно! У меня большой опыт, о котором вы сможете узнать, пройдя по следующим ссылкам: О моем танцевальном образовании можно узнать здесь: http://vk.com/topic-67886684_30857959 О моих победах можно посмотреть здесь: http://vk.com/topic-67886684_30857943 О моих постановках и достижениях можно узнать здесь:http://vk.com/topic-67886684_30858035

[ТЕ] Типичный Екатеринбург
«Типичный Екатеринбург» — сообщество № 1 в городе по оперативности, качеству новостей и эксклюзивам. Мы принимаем новости в предлагаемые записи и сообщения сообщества. По рекламе всегда можно обратиться к [id417690207|Сeргeю Xaхалеву]. По вопросам новостей к [id132521533|Милолике Третьяковой] Концепция сообщества такая: если в Екатеринбурге произошло что-то важное, серьёзное или интересное, то мы обязательно об этом расскажем. Мы не про мемы, приколы и котиков — мы про ежедневную пользу для вас. При использовании материалов «Типичного Екатеринбурга» ссылка на сообщество обязательна

Студия движения "Открытый город"
Кто мы? Семейная студия движения и арт-практик "Открытый город". В 2017 году мы начинали как маленькая студия движения для детей и молодых людей с РАС, а с нового, 2019 года работаем как полноценная семейная студия. Наша задача - сделать спорт и творчество доступными для всех, поэтому в расписании нашей студии вы найдете: - тренировки только для взрослых - занятия для родителей с детьми - тренировки для тех, кто может только утром или в выходные - занятия для детей и молодых людей с РАС - тренировки для всех желающих с любым уровнем подготовки - хореография для детей и подростков - игровые занятия, хор, вокал, игра на шумовых инструментах - тренировки по йоге в гамаках ...и многое другое. Адрес студии: Екатеринбург, ул. Вайнера, 36. По всем вопросам о занятиях, расписании и условиях набора звонить администратору: 8 999 548 69 52

REX AMBIENCE
Здесь я делюсь моментами, которые запечатлел, гуляя по лесам и полям. С детства я проводил много времени на природе, и мне никогда не было скучно. Надеюсь, вам понравятся мои видео, но, в конце концов, я надеюсь, что они вдохновят вас выйти из дома и по-настоящему насладиться природой.

Артем Аверкиев - Видеооператор
#снимаюкакнадо #снимаюкакчувствую Услуги: - репортажная видеосъемка - постановочная видеосъемка - монтаж - совместная разработка идеи

ЦЕХ | Центр современного танца
Мы учим современному танцу, свободному движению, пластике и хореографии. Наши преподаватели — танцовщики и хореографы — молодые, активные и творческие личности с опытом преподавания современного танца. Занятия проходят по адресу: м. Белорусская / 3-я Ямского поля улица 2к3, 3 подъезд, 3 этаж, офис 301 Звоните нам: 8 (985) 276 52 37 и пишите: [email protected]

Сила Безмолвия

ВОЛОНТЁРЫ: культурные проекты Екатеринбурга
Эта страница создана для поиска волонтеров на некоммерческие проекты в сфере культуры, искусства, образования, спорта и здорового образа жизни. Для того, чтобы разместить объявление о поиске волонтеров, пожалуйста, нажмите на кнопку «предложить новость» и сделайте свой пост! Объявления, не соответствующие тематике группы, будут отклонены модераторами.

DANCE OPEN | международный фестиваль балета
Наши онлайн-проекты: • #университетыбалета@dance_open — цикл лекций от танцевальных критиков • cecchetti.danceopen.com — авторская онлайн-энциклопедия, посвященная танцовщику и педагогу Энрико Чеккетти • vk.cc/asS7ME — справочник начинающего балетомана (FAQ о балете) • vk.cc/atvLHH — ютуб-передача Hot Culture: беседы о природе танца и его месте в современном мире с людьми, не имеющими прямого отношения к академическому балету • #[email protected]_open — домашние видео-открытки от звезд балета • vk. cc/athUv0 — маска в Инстаграм • vk.cc/atFXIk — буклет-путеводитель по XIX сезону фестиваля В рассылке мы рассказываем полезное о балете, фестивале, делаем скидки на билеты: vk.cc/8LGy1c Напишите нам: vk.me/dance_open

Теории и практики
Theory&Practice — ведущее научно-просветительское медиа о личном и профессиональном развитии. Практические инструменты и полезные теории, как оставаться актуальным, расширять кругозор и прокачивать экспертизу. С 2009 года рассказываем о том, как развиваться непрерывно. Мы продвигаем lifelong learning в России до того, как это стало мейнстримом.

ФОНД "КУЛЬТУРНЫЙ ТРАНЗИТ"
Базируемся в Екатеринбурге. ЧТО МЫ ДЕЛАЕМ - в молодежной среде осуществляем культурный обмен, в том числе: волонтерские поездки, обменные гастроли и выставки как профессиональных, так и любительских коллективов, художников; - организуем совместные проекты, направленные на решение общих или идентичных проблем территорий средствами культуры и искусства; - организовываем мастер-классы, ворк-шопы, краткосрочные и длительные стажировки для художников, галеристов, и других представителей творческих профессий и интересов; - изучаем опыт деятельности некоммерческих организаций в сфере культуры, в том числе опыт работы с людьми с ограниченными возможностями. ДЛЯ ЧЕГО МЫ ЭТО ДЕЛАЕМ - чтобы вовлечь как можно большее количество людей в активное потребление культуры и искусства; - чтобы сделать территорию Екатеринбурга еще более привлекательной для горожан.

★★★Dance Show BRIOLLET★★★
★Dance Show BRIOLLET★ - универсальное украшение любого торжества. ★Dance Show BRIOLLET★ - профессионалы своего дела. Яркая хореография, интересные костюмы и богатый репертуар. ★Dance Show BRIOLLET★ - Индивидуальный подход, мобильность и пунктуальность. Ищите нас в Instagram: DSBRIOLLET Теги: #dsbriollet #danceshowbriollet Работа на территории РФ Телефон для связи: 8-919-391-26-96

Уральский федеральный университет | УрФУ
Официально, Уральский федеральный. Привет! Еще мы есть здесь: 💡 tiktok.com/@urfu.ru 💡 instagram.com/urfu.ru 💡 t.me/urfu_ru 💡 facebook.com/ural.federal.university 💡 twitter.com/urfu 💡 ok.ru/uralfederal Анонсы событий #УрФУ: http://urfu.ru/ru/events/ Правила: 1. За мат, спам и оскорбления в комментариях — бан. 2. Мы не размещаем рекламу. Все вопросы пишите на [email protected] 3. Мы не размещаем информацию, не связанную с университетом.

WTF ?
Wikipedia, Twitter и Facebook поглощают нашу ежедневную жизнь. Мы - поколение WTF

Конференции, Семинары, Гранты, Бизнес Идеи
Web: http://feruz.ru Founder: https://vk.com/feruz

Лайфхакер
Мы рассказываем обо всём, что улучшает жизнь, доступно отвечаем на сложные вопросы, помогаем решать проблемы и делать повседневность осмысленной.

All about Dance
#contemporary_dv #jazzfunk_dv #hiphop_dv

Вдохновение.
- Вдохновение во всех проявлениях - интересные новости и старости в путешествиях и бытовой жизни!

M O L O K O
Мы создаем действительно крутое танцевальное шоу! Мы любим то, что мы делаем! И гордимся тем, что танцуем! MOLOKO - это большая сумасшедшая творческая команда: танцоров, хореографов, стилистов и костюмеров; готовых взрывать ваше воображение и покорять!!! информация о балете, можно посмотреть тут: http://ekaterinburg.top-artist.ru/Show_balet_Moloko/?info

Немецкий язык
Самая большая онлайн-школа немецкого языка в Европе. 16.000 учеников и 200 преподавателей. Групповые курсы и индивидуальные занятия для взрослых и детей. Готовим для сдачи экзаменов от уровня А1 до С1, Start Deutsch / TestDaF / DSH и ÖSD. Групповые онлайн-курсы https://deutschonline.ru/courses_online Индивидуальные занятия по скайпу https://deutschonline.ru/individualcurses Видеокурсы от А1 до С1 https://deutschonline.ru/videocurses Тест по немецкому языку https://deutschonline.ru/test Отзывы об обучении

Отзывы
Задать вопрос менеджеру в чате вк можно здесь 👉🏻 vk.me/deutschonline А еще у нас можно пить кофе, сидя прямо на любимом диванчике, потому что для учебы нужен компьютер, смартфон или планшет с выходом в интернет, а заниматься можно из любого города и из любой страны. Deutsch Online - самая большая мультиканальная сеть в Рунете о немецком языке и Германии. На данный момент у нас уже 1.500.000+ подписчиков Мы в социальных сетях ▶️ YouTube https://www.youtube.com/deutschonlineru?sub_confirmation=1 ▶️ Инстаграм www.instagram.com/deutschonline ▶️ Фейсбук www.facebook.com/deutschonline ▶️ Телеграм www.t.me/deutschonline ▶️ Сайт https://deutschonline.ru ▶️ Телефоны: 📱Для России +7 (495) 128-4000 📱Для Европы +48 (22) 60-22-555 ▶️ E-mail: [email protected] Кроме того у нас самый большой интернет портал по изучению немецкого языка, где вы найдете: полезные материалы, игры, видео и аудиоуроки. Мы поможем вам преодолеть языковой барьер!

Berhasm Кампания «Love Is Love»

от Адриано Б.

Новая коллекция от восточноевропейского коллектива Berhasm помогает найти жизненное вдохновение во время пандемии.

«За эти месяцы мы осознали, насколько разделяет людей, мешает взаимопониманию и открытости, мешает самовыражению. По мере того, как вводились новые запреты и меры контроля, мы только более остро осознавали опасность настоящей болезни - болезни отсутствия свободы, неравенства и безразличия.Но и на этот раз нам дали лекарство. Любовь стала таким лекарством от социального дистанцирования и тревожных мыслей, которое смело все границы и ограничения между людьми и дало надежду на новую эру. Эпоха, в которой любовь освобождает ".

Этому посвящена новая коллекция Berhasm. Он посвящен любви без границ, без ограничений, без ограничений, рамок и условностей, которые были так предписаны для всех нас в последние месяцы.

Рекламные материалы кампании:

Скилзашина Продюсер - Durazashina

- Durazashina Assistant Никита Худяков

Ассистент продюсера - Дмитрий Третьяков
DOP - Слава Фирсов
Фотоаппарат - Алексей Козлов
Фотография - Саша Фаворов
Оригинальный трек - Бен Клок
Звуковое оформление - Сергей Чуваев
MUA:

Кира Жильцова
Александра Огородникова
Татьяна Тихина Матушкина
Лариса Васильева
Ася Перекрест
Особая благодарность Лене Ясенковой
МОДЕЛИ:

Соня Хейфиц
Дмитрий Шугайкин
Галина Сокольская
София Родина
София-Злата Шестаковская
Светлана Март
Бабалесин Константин
Э. 3 Рита Косякова
Александр Либерзон Li-Ning отмечает 30-летие коллекции FW20 совместно с художниками 20127

актуально Кампания Berhasm «Любовь - это любовь»

предыдущая Li-Ning отмечает 30-летие коллекции FW20 совместно с художниками следующий 20127

Кристофер из Trend Models и Натан из Fifth Models, снятые объективом Фелипе Орельяны Фуэнтеалба и стилизованные Хавьером Велейро, эксклюзивно для »

Lil Nas X выпускает научно-фантастическое странное видео на песню« Montero (Зови меня своим именем) »

«Люди должны знать, что 2021 год будет для меня адским годом».

Винсент - французский дизайнер, представляющий новую волну талантов, рожденных опытом работы с лучшими творцами Парижа.

Восточноевропейский модный коллектив Berhasm выпустил новую кампанию сезона осень / зима 2021 «Запри мир», которая представляет собой серию коллажей, отражающих поворот нашего восприятия реальности за месяцы изоляции.

Фотограф Делвин Камара делится эксклюзивом для Fucking Young! это история с нигерийскими моделями из агентства My Booker, снятая во время недавней поездки фотографа в африканскую страну.

«ТАТАРКА» представляет новое настроение видео «МАЛЬЧИКИ И ДЕВОЧКИ»

Видео ожило как очень атмосферное и расслабляющее произведение искусства, явно посвященное эстетике 90-х, с красивыми людьми и одинаково красивыми местами.

Раф Симонс представил свою коллекцию Осень / Зима 2021, демонстрируя равновесие и контраст между разрозненными элементами

Гленн Мартенс копается в архивах Diesel, исследуя прошлое и настоящее.

Дэвид Каталон представил свою новую коллекцию украшений Весна / Лето 2021, в которой Рикардо Гомеш сфотографирован Дульсе Даниэль и стилизован Лаурой Гонсалес.

ARDUSSE представил лукбук своей коллекции Осень / Зима 2021, снятый Франческо Петрони и арт-директор Braga + Federico.

Гонсало Наварро Монтэгут в Trend Model Management, снято Габо Боза и стилизовано Андреа Йерро, эксклюзивно для Fucking Young! В сети.

Людовик де Сен-Сернин представил лукбук своей коллекции «E-Boy Season 2», запечатленную объективом Амита Исраэля.

На осень / зиму 2021 года MAXXIJ представил задушевную коллекцию под названием «Кровь будущего.

Mr P., торговая марка MR PORTER под собственной торговой маркой, рада представить новые кроссовки, заменяющие кожу, в свою коллекцию обуви.

Лукас Юурлинк в Elite, сфотографированный Джеком Греем и стилизованный Мет Килинком, эксклюзивно для Fucking Young! В сети.

young n sang представила лукбук своей коллекции 2021 года, сфотографированную Санглим Ли.

Эта экологичная коллекция передает настроение красивых сельских пейзажей. Бренд был вдохновлен красотами корейских сельских пейзажей, гор и небольшого… »

Взгляните на закулисье VETEMENTS осень / зима 2021, запечатленные объективом Atacama Intl.

Продолжая свое знаковое сотрудничество, известный спортивный бренд и культовый британский бренд выпускают эксклюзивные кроссовки ASICS x VIVIENNE WESTWOOD GEL-KAYANO ™ 27 LTX.

Эстелита Мендонса представила свою коллекцию осень / зима 2021 под названием Raver Camping на выставке Portugal Fashion.

«Акт 1, Акт 2, Акт 3» - первая сольная коллекция Леви Кампелло после окончания Школы дизайна Род-Айленда в 2019 году.

УЭЛС БОННЕР исследует истоки танцевальной музыки на Ямайке начала 1980-х годов.

SHOOP представил свою коллекцию Осень / Зима 2021 во время Недели моды Rakuten в Токио.

Джей-Джей Йохансон 13-й альбом «Тест Роршаха»

В этом 13-м альбоме Джей-Джей снова сумел уловить и передать магию в каждой песне.

Фотограф Ода Берби объединился со стилистом Элис Ван, чтобы запечатлеть эту историю эксклюзивно для Fucking Young! В сети.

Это пятый сезон для Eye / LOEWE / Nature, и главная цель коллекции - экологическая ответственность.

Brady at Storm Модели, сфотографированные Кристофом Лангенбергом и стилизованные Рео Дрингом, эксклюзивно для Fucking Young! В сети.

После празднования своего 30-летия в 2020 году Li-Ning продвигается вперед к весне / лету 2021 года с запуском «New Frontier».

Передавая ощущение бесконечности, повторяющуюся тему всех коллекций Вирджила Абло, этот гардероб воплощает и подчеркивает повседневную энергию американского рэпера 21 Savage, который является эталоном для фигуристов и артистов Западного побережья.

Фотоперформансы ЛаБрюса изображают театральные выражения насилия, секса, похоти и пыток в том, что он описывает как «игровую среду», чтобы исследовать человечество, сексуальность и их отношение к смерти.

Рекомбинантные белки распознавания пептидогликанов человека обнаруживают антихламидийную активность

РЕФЕРАТ

Белки распознавания пептидогликанов (PGLYRP) являются врожденными иммунными компонентами, которые распознают пептидогликан и липополисахариды бактерий и проявляют антибактериальную активность.Недавно было показано, что у облигатного внутриклеточного паразита Chlamydia trachomatis есть пептидогликан. Однако антихламидийная активность PGLYRP еще не продемонстрирована. Целью нашего исследования было проверить, проявляют ли PGLYRP антибактериальную активность против C. trachomatis. Таким образом, мы клонировали области, содержащие человеческие гены Pglyrp1 , Pglyrp2 , Pglyrp3 и Pglyrp4 для последующей экспрессии в линиях клеток человека. Мы получили стабильные клеточные линии HeLa, которые секретируют рекомбинантные человеческие PGLYRP в культуральную среду.Мы также создали очищенные рекомбинантные PGLYRP1, -2 и -4 и подтвердили их активность против грамположительных (Bacillus subtilis) и грамотрицательных (Escherichia coli) бактерий. Кроме того, мы исследовали активность рекомбинантных PGLYRP против C. trachomatis и определили их МИК. Мы также наблюдали снижение инфекционной способности элементарных тел хламидий в следующем поколении после однократного воздействия PGLYRP. Наконец, мы продемонстрировали, что PGLYRP прикрепляются к элементарным тельцам C. trachomatis и активируют экспрессию хламидийной двухкомпонентной системы ответа на стресс.Таким образом, PGLYRP подавляют развитие хламидийной инфекции.

ВВЕДЕНИЕ

Белки распознавания пептидогликанов (PGLYRP) являются членами системы врожденного иммунитета. Первоначально было показано, что они связывают бактериальный пептидогликан и активируют путь пропенолоксидазы у насекомых (1). Позже PGLYRP были обнаружены также у млекопитающих и других таксономических групп (2, 3). У млекопитающих есть четыре PGLYRP, от PGLYRP1 до -4, которые были идентифицированы как бактерицидные белки (4, 5). Было показано, что PGLYRP распознают не только бактериальный пептидогликан, но и липополисахариды на внешней мембране грамотрицательных бактерий (6).В 2010 году был предложен новый механизм уничтожения бактерий с участием PGLYRP. PGLYRP связываются с пептидогликаном клеточной стенки бактерий или липополисахаридами внешней мембраны и гиперактивируют реакцию защиты от стресса у бактерий, которая приводит к самоубийству бактерий (7). Было показано, что PGLYRP связывают пептидогликан и липополисахариды в Bacillus subtilis и Escherichia coli, соответственно, и активируют бактериальные двухкомпонентные системы (TCS) CssS-CssR в B. subtilis и CpxA-CpxR в E. coli, что приводит к гибели бактерий (7 ).В этих TCS CssS и CpxA включают домен гистидинкиназы (HK), а CssR и CpxR действуют как регуляторы ответа. В ранних исследованиях Лу и соавт. (8) продемонстрировали бактерицидную активность PGLYRP против различных грамположительных и грамотрицательных бактерий in vitro и in vitro и vivo . PGLYRP проявляют как распознающую, так и эффекторную активность против различных бактерий (3, 5, 7–9). Однако их активность против внутриклеточных патогенных паразитов, таких как хламидии, еще не продемонстрирована.

Хламидии чередуются между двумя формами: инфекционным, метаболически неактивным элементарным тельцем (EB) и неинфекционным, метаболически активным ретикулярным тельцом (RB) (10). Обе формы RB и EB содержат липополисахариды (11). Более того, Liechti et al. (12) сообщили, что C. trachomatis содержит пептидогликан. Он был обнаружен при переходе от формы EB к форме RB (12). Эти патогенные бактерии могут считаться потенциальными мишенями для PGLYRP. Более того, PGLYRP были обнаружены в тканях, которые, как было показано, подвергаются атаке C.trachomatis (13, 14). В 2003 году Ку и Стивенс (15) охарактеризовали пару генов C. trachomatis, которые кодируют белки с аминокислотными последовательностями, сходными с таковыми из бактериального TCS. Пара включает компонент с доменом HK (CtcB) и белок-регулятор ответа (CtcC). Эти белки были обнаружены в EB C. trachomatis. Таким образом, целью данного исследования было проверить, проявляют ли PGLYRP антибактериальную активность против внутриклеточной патогенной бактерии C. trachomatis. Таким образом, мы создали очищенные рекомбинантные PGLYRP человека, протестировали их активность против грамположительных и грамотрицательных бактерий, определили их МИК для C.trachomatis и исследовали экспрессию генов, кодирующих TCS, после обработки хламидийных EB с помощью PGLYRP.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Бактериальные штаммы и клеточные линии. Клетки HeLa (ATCC CCL-2) выращивали в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM; Life Technologies) с 10% инактивированной нагреванием фетальной телячьей сывороткой (FBS), 2 мМ глутамина. , 100 Ед / мл пенициллина и 100 мкг / мл стрептомицина при 37 ° C в присутствии 5% CO 2 . Клетки Expi293F (Life Technologies) культивировали согласно рекомендациям производителя.E. coli Top10 (Invitrogen), Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 и Bacillus subtilis 168 HT были любезно предоставлены А. Прозоровым (ИОГ РАН) и выращены в бульоне Лурия-Бертани (LB) при 37 °. С. EB C. trachomatis D / UW-3 / Cx (ATCC VR-885) выделяли ультрацентрифугированием в градиенте урографина, как описано ранее (16). Для роста C. trachomatis в клетках HeLa использовали DMEM с 0,5% глюкозы, 10% FBS и 25 мкг / мл гентамицина. До того, как К.trachomatis клетки HeLa высевали в 24-луночные планшеты (Corning) в количестве приблизительно 10 5 / лунку и культивировали в течение 24 часов для достижения слияния монослоя. Затем монослой клеток инфицировали инокулятом C. trachomatis при множественности инфицирования (MOI) от 0,9 до 1. Клетки центрифугировали в течение 1 ч при 900 × g .

Для продукции белка клетки HeLa-PGLYRP инкубировали в течение ночи, трижды промывали DMEM и затем культивировали в DMEM без FBS и содержащей 10 мкг / мл гентамицина.Клетки культивировали еще 72 часа при 37 ° C в присутствии 5% CO 2 .

ПЦР. ПЦР выполняли в термоциклере DNA Engine Tetrad 2 (Bio-Rad) в реакционном объеме 25 мкл с 2–3 мМ MgCl 2 , 0,2 мМ каждого дезоксинуклеозидтрифосфата (dNTP), 67 мМ трис- HCl (pH 8,3), 16,7 мМ (NH 4 ) 2 SO 4 , 0,5 ед. ДНК-полимеразы Taq (Thermo Scientific), от 1 до 10 нг ДНК и 5 пмоль каждого праймера. Условия термоциклирования (° C / с) составляли 95/120 для 1 цикла и 95/10, от 55 до 62/10 и от 72/20 до 120 для 25 циклов с конечным удлинением 72/120.

Обратная транскрипция. Суммарную РНК выделяли с помощью TRIzol (Invitrogen) в соответствии с инструкциями производителя. Из-за тканевой специфичности PGLYRP (14) белые кровяные тельца были использованы для получения мРНК Pglyrp1 . Клеточную линию HepG2 использовали для получения мРНК Pglyrp2 , а биопсийный материал пищевода человека использовали для получения мРНК Pglyrp3 и Pglyrp4 . Загрязнение ДНК удаляли расщеплением ДНКазой ДНКазой I (Thermo Scientific).кДНК затем синтезировали обратной транскрипцией с использованием обратной транскриптазы вируса мышиного лейкоза Молони (Promega) в соответствии с протоколом производителя и праймером polyT (см. таблицу S1 в дополнительном материале).

Клонирование кодирующих областей Pglyrp . КДНК амплифицировали со специфическими олигонуклеотидами (последовательности см. В таблице S1 в дополнительном материале). Для получения векторов экспрессии гены PGLYRP клонировали в pEGFP-N1 (Clontech) и pcDNA3.4 вектора TOPO (Life Technologies). Таким образом, мы сконструировали плазмиды pcDNA-IGG-PGLYRP, кодирующие Pglyrp , слитые с легкой цепью кроличьего IgG, сайтом протеазного расщепления вируса травления табака (TEV) и C-концевой меткой 6His. Плазмидную ДНК выделяли и проверяли путем секвенирования с помощью набора BigDye Terminator Cycle Sequencing (v.3.1) на анализаторе генов ABI PRISM 3730xl (Applied Biosystems) с олигонуклеотидами pN1-pN2 для всех векторов pEGFP-N1-PGLYRP и Cmv_F-pcDNA_R для всех pcDNA3.4-PGLYRP векторы.Схемы клонирования см. На рис. S1 – S3 в дополнительном материале.

Трансфекция клеток HeLa и Expi293F. Клетки Expi293F культивировали и трансфицировали векторами pcDNA-IGG-PGLYRP в соответствии с инструкциями производителя. Клетки HeLa трансфицировали векторами pEGFP-N1-PGLYRP и реагентом для трансфекции TransPass COS / 293 (NEB) в соответствии с инструкциями производителя, и стабильно трансфицированные клоны отбирали с помощью 500 мкг / мл G418 (Life Technologies).

Генерация PGLYRP1, -2 и -4 из слитого белка легкой цепи IgG-PGLYRP.Клетки Expi293F, трансфицированные плазмидами pcDNA-IGG-PGLYRP, культивировали в 100-миллилитровых колбах с конечным объемом 30 мл культуральной среды Expi293. Через 120 ч после трансфекции культуру клеток центрифугировали при 130 × g в течение 10 мин. Культуральную среду разводили в 8-кратном хроматографическом буфере (конечные концентрации 500 мМ NaCl, 20 мМ NaH 2 PO 4 и 10 мМ имидазола [pH 7,4]) и затем центрифугировали (12000 × g в течение 15 мин. ). Конечный раствор наносили на колонку, содержащую 1 мл Ni Sepharose High Performance (GE Healthcare), уравновешенную хроматографическим буфером.Колонку промывали 200 мл промывочного буфера (500 мМ NaCl, 20 мМ NaH 2 PO 4 , 40 мМ имидазол, pH 7,4), а затем связанную фракцию элюировали элюирующим буфером (500 мМ NaCl, 20 ммоль). мМ NaH 2 PO 4 , 500 мМ имидазол, pH 7,4). Скорость потока составляла 1,5 мл / мин. Белки очищали с помощью системы быстрой жидкостной хроматографии белков AKTA (GE Healthcare). Раствор слитого белка подвергали диализу против фосфатно-солевого буфера (PBS, pH 7.4) при 4 ° C в течение ночи. Концентрацию белка измеряли с помощью анализа белка Брэдфорда. Затем добавляли 1% (мас. / Мас.) Протеазы TEV (Sigma) и 0,5% (об. / Об.) 2-меркаптоэтанола, и смесь затем инкубировали при комнатной температуре в течение ночи. После инкубации раствор центрифугировали при 12000 × g в течение 15 мин. Супернатант разбавляли хроматографическим буфером до конечного объема 50 мл и наносили на колонку с Ni-сефарозой для очистки, как описано ранее.Присутствие PGLYRP в собранных фракциях определяли с помощью Laemmli SDS-PAGE.

В качестве контролей для последующих экспериментов с очищенными PGLYRP мы использовали холостые контрольные образцы и буфер для элюции. Для приготовления холостого контрольного образца мы наносили культуральную среду из клеток Expi293F, трансфицированных вектором pcDNA_IGG, на колонку с Ni-сефарозой. Затем мы диализовали элюат против PBS, pH 7,4, при 4 ° C в течение ночи. Мы добавили в раствор протеазу TEV и 2-меркаптоэтанол в тех же концентрациях, что и для протеолиза PGLYRP.Раствор инкубировали в течение ночи, разбавляли в 10 раз и затем наносили на колонку с Ni-сефарозой. Элюат служил холостым контрольным образцом.

Матричная лазерная десорбционная ионизация - времяпролетный масс-спектрометрический анализ (MALDI-TOF). Полосы белка после одномерного SDS-PAGE подвергали гидролизу трипсином в геле. Кусочки геля (от 2 до 3 мм 3 ) нарезали и дважды промывали 100 мл 0,1 М бикарбоната аммония и 40% ацетонитрила в течение 30 мин при 37 ° C, обезвоживали 100 мл ацетонитрила и сушили на воздухе.Затем кусочки геля обрабатывали 4 мл раствора модифицированного трипсина (Promega) с концентрацией 12,5 мг / мл в 40 мМ бикарбонате аммония и 10% ацетонитриле в течение 16 часов при 37 ° C. Пептиды экстрагировали 8 мл водного раствора 0,5% трифторуксусной кислоты в течение 20 мин. Аликвоты образцов (2 мл) смешивали на стальной мишени с 0,3 мл раствора 2,5-дигидроксибензойной кислоты (Bruker Daltonics) (75 мг / мл в 30% ацетонитриле – 0,5% трифторуксусной кислоте). Масс-спектры записаны на масс-спектрометре Ultraflex II MALDI-TOF-TOF (Bruker Daltonics), оборудованном неодимовым лазером.Молекулярные ионы измерялись в режиме отражателя; точность измерения пика массы составляла 0,005%. Спектры фрагментных ионов были получены с помощью лазерно-индуцированной диссоциации, ускоренной за счет низкоэнергетической диссоциации, вызванной столкновениями, с гелием в качестве газа столкновения. Точность измерения пика массы фрагментного иона составляла 5 Да. Фрагменты тандемной масс-спектрометрии (МС / МС) идентифицировали с помощью программного обеспечения BioTools (Bruker Daltonics) и ионного поиска Mascot MS / MS. Идентификацию белков проводили с помощью поиска по пептидным отпечаткам пальцев с помощью программного обеспечения Mascot (Matrix Science Inc.). Допускалось одно пропущенное расщепление, цис-пропионамид и окисление Met. Уровень белка> 49 считался значимым ( P <0,05).

Определение МИК для E. coli и B. subtilis. МИК были определены как самые низкие концентрации PGLYRP, которые подавляют видимый рост бактерий. Метод разбавления в бульоне использовали в соответствии со ссылкой 17. Вкратце, 150 мкл среды LB, содержащей E. coli или B. subtilis в количестве 5 × 10 5 КОЕ / мл, добавляли в лунки 96-луночного планшета.Готовили серийные 2-кратные разведения PGLYRP в забуференном солевом растворе Хэнкса (HBSS) (Thermo Scientific) и добавляли в лунки до конечного объема 200 мкл. Планшеты инкубировали при 37 ° C в течение 18 ч. Образцы роста в чашках были проанализированы, и МИК были определены, как описано ранее (17).

Определение МИК для C. trachomatis. Измерения МИК для C. trachomatis выполняли следующим образом. Клетки HeLa высевали в лунки 24-луночного планшета с покровными стеклами и культивировали до достижения 90% слияния.Мы приготовили серийные 2-кратные разведения PGLYRP. Белки разводили в HBSS до конечного объема 199 мкл. Один микролитр инокулята C. trachomatis (10 5 EB / мкл) добавляли к каждому образцу PGLYRP, который затем инкубировали при встряхивании при 37 ° C в течение 2 часов. Культуральную среду отсасывали из лунок, засеянных клетками HeLa, и к клеткам добавляли 200 мкл образцов PGLYRP с хламидийными EB или контрольными образцами. Планшеты центрифугировали (900 × г, , 1 час) и добавляли свежую DMEM до конечного объема 1 мл.Мы добавили HBSS и пустой контрольный образец в HBSS в контрольные лунки. Чашки культивировали при 37 ° C в присутствии 5% CO 2 в течение дополнительных 47 часов. После инкубации лунки фиксировали 4% параформальдегидом в течение 20 минут и пропитывали 1% Triton X-100 в течение 30 минут. Клетки окрашивали методом прямой иммунофлуоресценции куриными антихламидийными липоолигосахаридными антителами, меченными флуоресцеинизотиоцианатом (FITC; Galart Diagnosticum) в течение 1 часа. Раствор антител также содержал бромид этидия.Окрашенные покровные стекла помещали на предметные стекла с монтажной средой. Изображения 10 случайно выбранных полей для каждого покровного стекла были получены с помощью конфокального микроскопа Nikon Eclipse E800 (Nikon, Япония) с возбуждением на 488 нм (канал FITC) и 594 нм (канал бромистого этидия), объективом 10 × Plan Fluor и Объектив Plan Fluor 40 ×. Количество меченых клеток в обоих каналах определяли количественно с помощью программного обеспечения ImageJ (версия 1.48; RSB [http://imagej.nih.gov/]). Скорость инфицирования определяли как отношение количества клеток с включениями, меченными антителами (канал FITC), к общему количеству клеток (канал бромистого этидия).МИК определялись как самые низкие концентрации PGLYRP, при которых скорость инфицирования снижалась до> 90% от таковой в контрольных лунках (18).

Производство инфекционного потомства. Чтобы проверить действие PGLYRP на продукцию инфекционного потомства, мы высевали клетки HeLa в два 24-луночных планшета и культивировали их до достижения 90% слияния. В каждый планшет мы добавляли аликвоту PGLYRP (100 нг / мл), а также пустой контрольный образец равного объема в контрольные лунки. Клетки в обеих чашках были инфицированы C.trachomatis при MOI 1, как описано выше, и культивировали при 37 ° C в течение дополнительных 71 часа. Затем один из планшетов фиксировали и использовали для подсчета единиц, образующих включение (IFU). Титры (в IFUs на миллилитр) рассчитывали, как описано ранее (16). В другом планшете культуральную среду удаляли из лунок. Клетки ресуспендировали в 200 мкл HBSS с помощью пипетки, переносили в микроцентрифужные пробирки и лизировали замораживанием / оттаиванием. Чтобы подготовить посевной материал с эквивалентными MOI для следующего раунда заражения, мы разводили лизаты в соответствии с титрами, рассчитанными с использованием первой чашки.Разбавленные лизаты использовали для заражения свежих клеток HeLa. Затем клетки фиксировали через 48 ч после инокуляции. Подсчитывали IFU и рассчитывали титры, как описано выше.

Присоединение PGLYRP к C. trachomatis. Чтобы доказать, что PGLYRP прикрепляются к C. trachomatis, растворы, содержащие очищенные PGLYRP (50 нг в 100 мкл HBSS), смешивали с 30 мкл инокулята C. trachomatis (10 5 клеток / мкл). ). Мы использовали очищенные PGLYRP в HBSS и EB в HBSS в качестве контрольных образцов. Образцы центрифугировали при 20,000 × g при 4 ° C в течение 30 мин.Супернатант собирали в свежую пробирку. Осадок промывали HBSS, центрифугировали при 20000 × g в течение 10 мин при 4 ° C и разбавляли в 100 мкл HBSS. Равные аликвоты осадка и супернатанта анализировали вестерн-блоттингом с мышиным моноклональным антителом против 6His для обнаружения прикрепления C. trachomatis и PGLYRP.

Вестерн-блоттинг. PGLYRP, разведенные в буфере для образцов Лэммли, нагревали до 95 ° C в течение 10 мин. Зонды разделяли с помощью 12% SDS-PAGE. После разделения белки переносили (полусухой перенос, 1 мА / см 2 в течение 1 ч) на поливинилидендифторидную мембрану (GE Healthcare) в буфере для переноса трис-глицина (48 мМ Трис, 39 мМ глицин, 0.04% SDS, 20% метанола). Мембрану блокировали 3% обезжиренным сухим молоком в PBS и обрабатывали мышиным моноклональным антителом против 6His в разведении 1: 10 000 (Invitrogen) при 4 ° C в течение ночи. Мембрану трижды промывали 0,1% Tween 20 в PBS, инкубировали с овечьим антителом против IgG мыши, связанным с пероксидазой хрена, в разведении 1:25 000 (GE Healthcare) в течение 1 ч, а затем трижды промывали. Мембрану обрабатывали реагентами для определения Вестерн-блоттинга ECL Plus (GE Healthcare) в соответствии с инструкциями производителя.Сигналы детектировали с помощью системы ChemiDoc XRS + (Bio-Rad).

Анализ активации экспрессии гена TCS хламидии. Клетки HeLa высевали в лунки 24-луночного планшета и культивировали до достижения 90% слияния. PGLYRP (100 нг / мл) разводили в HBSS до конечного объема 199 мкл. Один микролитр инокулята C. trachomatis (10 5 EB / мкл) добавляли к каждому образцу PGLYRP. Мы добавили HBSS и пустые контрольные образцы в HBSS в контрольные лунки. Культуральную среду отсасывали из лунок, засеянных клетками HeLa, и к клеткам добавляли 200 мкл образцов PGLYRP с хламидийными EB или контрольными образцами.Клетки инфицировали EB C. trachomatis при MOI, равном 1. Клетки центрифугировали (900 × g, , 1 час). Тотальную РНК выделяли в различные моменты времени после инокуляции от 0 до 72 часов. кДНК получали со специфическими праймерами (CtcC_R, CtcB_R, EuoR и OmcB_R). ПЦР в реальном времени выполняли с праймерами CtcB_F-CtcB_R, CtcC_F-CtcC_R, EuoF-EuoR и OmcB_F-OmcB-R (см. Таблицу S1 в дополнительном материале). ПЦР в реальном времени выполняли с помощью системы обнаружения ПЦР в реальном времени CFX96 Touch (Bio-Rad) с 0.1 × SYBR green I (Invitrogen), 1 × Taq буфер с (NH 4 ) 2 SO 4 (Thermo Scientific), 0,2 мМ каждого dNTP, 0,5 U ДНК-полимеразы Taq (Thermo Scientific ), 10 нг кДНК и каждый праймер по 5 пМ. Данные были нормализованы к референсным генам раннего восходящего белка открытой рамки считывания ( euo ) и большого богатого цистеином периплазматического белка ( omcB ) и вычислением среднего геометрического трех повторов, как описано в ссылке 19.Изменения складчатости определяли как отношения уровней экспрессии генов в разные моменты времени к уровням в 0-часовой момент времени.

Статистика. Анализ данных проводился с помощью параметрического статистического анализа (тест Стьюдента t и тест множественного сравнения [двусторонний дисперсионный анализ]) с помощью программного обеспечения Statistica (версия 8.0; StatSoft Inc.). Данные представлены как средние значения ± стандартное отклонение. Различия между средними считались значимыми при значении P <0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Временная трансфекция и идентификация белков. Чтобы получить рекомбинантные человеческие PGLYRP, мы создали стабильные клеточные линии HeLa, которые секретируют PGLYRP в культуральную среду. Эти линии были получены путем трансфекции клеток HeLa векторами pEGFP-N1-PGLYRP (см. Фиг. S1 в дополнительном материале). Трансфицированные клетки отбирали с помощью G418, и экспрессию генов PGLYRP подтверждали с помощью обратной транскрипции-ПЦР. Мы обнаружили рекомбинантные белки в супернатанте культуры методом вестерн-блоттинга (рис.1). Однако мы не смогли получить очищенные белки из-за низкого уровня накопления. Затем мы временно трансфицировали клетки Expi293 векторами pcDNA-PGLYRP (см. Рис. S2 в дополнительном материале). Продукцию PGLYRP в культуральной среде подтверждали вестерн-блоттингом (не показано). В этом случае мы также не смогли получить очищенные белки из-за низкого выхода. Таким образом, мы сконструировали новые векторы pcDNA-IGG-PGLYRP (см. Рис. S3 в дополнительном материале), кодирующие легкую цепь кроличьего IgG, слитую с PGLYRP, с промежутками между сайтом расщепления протеазой TEV.Временная трансфекция клеток Expi293 векторами pcDNA-IGG-PGLYRP вызвала усиленную секрецию рекомбинантных белков в культуральную среду, что впоследствии позволило нам очистить рекомбинантные человеческие PGLYRP1, -2 и -4 с помощью хроматографии. Уровень накопленного рекомбинантного PGLYRP3 оказался недостаточным для последующей очистки.

Фиг. 1.

Вестерн-блот-анализ рекомбинантных человеческих PGLYRP из клеток HeLa, трансфицированных векторами pEGFP-N1-PGLYRP. Дорожки: а, PGLYRP1; b, PGLYRP2; c, PGLYRP3; d, PGLYRP4; M, маркеры молекулярной массы (соответствующие значения [в килодальтонах] показаны слева).

Слитые белки подвергались протеолизу протеазой TEV (20) в присутствии 0,5% 2-меркаптоэтанола. Оптимальное соотношение субстрат: протеаза составляло 100: 1 (вес / вес). В этом случае почти полное расщепление произошло после инкубации в течение ночи. Из-за высокой концентрации 2-меркаптоэтанола образцы разбавляли в 10 раз, чтобы избежать восстановления Ni 2+ во время последующей хроматографической очистки. Очищенные белки анализировали с помощью SDS-PAGE (фиг.2) и идентифицировали с помощью анализа MALDI-TOF (см. Фиг.S4 в дополнительном материале). Конечный выход чистого PGLYRP1, -2 и -4 составлял приблизительно 50 мг / л исходной культуры клеток.

Рис. 2.

Анализ Laemmli SDS-PAGE, окрашенный кумасси G-250, рекомбинантных PGLYRP, выделенных из супернатантов культуральной среды клеток Expi293F, трансфицированных векторами pcDNA-IGG-PGLYRP. Дорожки: от а до с, очищенный PGLYRP1, -2 и -4 соответственно; m, маркеры молекулярной массы (соответствующие значения [в килодальтонах] показаны справа).

Определение МИК.Чтобы проверить антибактериальную активность полученных рекомбинантных белков, мы измерили их МИК для E. coli и B. subtilis (таблица 1). Полученные результаты позволили подтвердить наличие антибактериальной активности PGLYRP. Кроме того, мы определили МИК PGLYRP для C. trachomatis (таблица 1).

ТАБЛИЦА 1

МИК PGLYRP1, PGLYRP2 и PGLYRP4, определенные для E. coli, B. subtilis и C. trachomatis

Присоединение PGLYRP к C. trachomatis. Мы проверили, прикрепляются ли PGLYRP к C.trachomatis. С этой целью мы проанализировали четыре образца с помощью вестерн-блоттинга с мышиным анти-6His антителом (рис. 3). Первый образец был очищен PGLYRP1 в HBSS (рис. 3, дорожка а), второй образец представлял собой супернатант центрифугированной смеси PGLYRP1 с хламидийными EB в HBSS (рис. 3, дорожка b), третий образец представлял собой осадок центрифугировали смесь PGLYRP1 с хламидийными EB в HBSS (рис. 3, дорожка c), а четвертый образец представлял собой осадок центрифугированных хламидийных EB в HBSS (рис. 3, дорожка d). Мы обнаружили, что PGLYRP1 обнаруживался преимущественно в осадке после центрифугирования смеси PGLYRP с хламидийными EB (рис.3, дорожки а и с, полосы PGLYRP). Мы также наблюдали неспецифическое окрашивание хламидийных белков (рис. 3, дорожки c и d, полосы U.B.). Аналогичные результаты были получены с PGLYRP2 и -4. Обнаружение PGLYRP в осадке после центрифугирования смеси PGLYRP с хламидийными EB подтвердило прикрепление PGLYRP к хламидийным EB.

Фиг. 3.

Вестерн-блот-анализ присоединения рекомбинантного PGLYRP1 к C. trachomatis. Дорожки: а, очищенный PGLYRP1 в HBSS; б - супернатант центрифугированной смеси PGLYRP1 с хламидийными EB в HBSS; c - осадок центрифугированной смеси PGLYRP1 с хламидийными EB в HBSS; г - осадок центрифугированных хламидийных EB в HBSS.Верхние неспецифические полосы (U.B.) соответствуют неспецифическому окрашиванию хламидийных белков. Дорожка M, маркеры молекулярной массы (соответствующие значения [в килодальтонах] показаны справа).

Производство инфекционного потомства. Чтобы проверить, подавляют ли PGLYRP образование инфекционного потомства, мы добавили PGLYRP к клеткам HeLa и инфицировали их EB C. trachomatis. В первом раунде заражения мы обнаружили снижение титров хламидий во всех лунках, в которые были добавлены PGLYRP перед инокуляцией C.trachomatis EBs (рис. 4А). Из-за разницы в титрах между образцами посевной материал, полученный после первого раунда заражения, разбавляли для достижения эквивалентных значений MOI. Разбавленные инокуляты использовали для второго раунда инфицирования свежих клеток HeLa. Через 48 часов после инокуляции мы обнаружили повышенные титры в контрольных лунках по сравнению с исходными титрами (фиг. 4B). Это наблюдение показывает рост хламидий в контрольных лунках. В лунки, в которые добавляли PGLYRP перед инокуляцией C.trachomatis, мы обнаружили титры ниже исходных (рис. 4Б). Таким образом, наши результаты демонстрируют, что PGLYRP подавляют рост хламидий и снижают продукцию инфекционного потомства.

Рис. 4.

Изменения титров родительского и потомства C. trachomatis после обработки очищенными выделенными PGLYRP, добавленными к клеткам HeLa. Родительские титры рассчитывали через 72 часа после заражения (А). Чтобы нормализовать данные родительских титров, образцы разбавляли для достижения эквивалентных значений MOI (горизонтальная линия) для анализа продукции инфекционного потомства (B).В качестве контроля использовали холостой контрольный образец.

Анализ активации экспрессии гена TCS хламидии. Чтобы проверить, активируют ли PGLYRP хламидийный TCS, мы проанализировали динамику экспрессии ctcB и ctcC после инфицирования клеток HeLa EB, обработанных PGLYRP. Мы использовали пустой контрольный образец в HBSS в качестве контроля. Мы выделили тотальную РНК из инфицированных клеток HeLa через 0, 1, 24, 48, 60 и 72 ч после инокуляции. ПЦР-анализ в реальном времени показал повышенные уровни генов ctcB и ctcC через 1 и 72 часа после инокуляции в случаях, когда EB были обработаны PGLYRP (рис.5). Кроме того, мы увеличили временное разрешение, используя для анализа 0, 15, 30, 60, 90, 120, 180 и 300 минут после прививки. Максимальные уровни генов ctcB и ctcC наблюдались через 2 ч после инокуляции (рис. 6). В контрольных образцах мы не обнаружили существенных различий в указанные моменты времени (рис. 5 и 6). Таким образом, обработка хламидийных EB с помощью PGLYRP активирует экспрессию генов, участвующих в двухкомпонентной системе стресс-ответа.

Рис. 5

Анализ активации экспрессии гена двухкомпонентной системы ответа на стресс хламидий после обработки очищенными рекомбинантными PGLYRP через 1, 24, 48, 60 и 72 часа после инокуляции. Количественные данные ПЦР были нормализованы, и кратное изменение уровня мРНК было определено как 2 -ΔΔ CT . Данные выражены как кратное изменение мРНК ± стандартная ошибка. Пустой контрольный образец использовали в качестве контроля. Отличия от нетрансфицированного контроля считались значимыми, если значение P было <0.05 (*).

Рис. 6.

Анализ активации экспрессии гена, связанного с системой двухкомпонентного стрессового ответа хламидий, после обработки PGLYRP через 15, 30, 60, 90, 120, 180 и 300 мин после инокуляции. Количественные данные ПЦР были нормализованы, и кратность изменения уровня мРНК была определена как 2,1 -ΔΔ CT . Пустой контрольный образец использовали в качестве контроля. Данные выражены как кратные изменения уровней мРНК ± стандартные ошибки.

ОБСУЖДЕНИЕ

В настоящем исследовании мы получили растворимые рекомбинантные белки распознавания пептидогликана человека в линии клеток человека Expi293F с выходами 50 мг / л культуральной среды.Поскольку стабильные клеточные линии и временная трансфекция генными конструкциями, кодирующими PGLYRP, дали недостаточный выход для очистки белков, мы затем слили PGLYRP с легкими цепями IgG. Эти слитые белки чередовались с сайтом протеазы TEV для дальнейшего расщепления и очистки. Рекомбинантные слитые белки были обнаружены в культуральной среде клеток Expi293F, трансфицированных pcDNA3.4-IGG-PGLYRP. Затем их очищали от культуральной среды и отделяли от легкой цепи IgG протеолизом (рис.2). Таким образом, мы разработали протокол для генерации чистых PGLYRP в клетках Expi293F.

Ранее было показано, что рекомбинантные человеческие PGLYRP, продуцируемые в клетках Drosophila S2 и COS-7 обезьян, обладают бактерицидной активностью против различных бактерий (8). Мы протестировали антибактериальную активность PGLYRP, экспрессируемых в гомологичной системе экспрессии. Эти белки продемонстрировали активность против грамположительных B. subtilis и грамотрицательных E. coli, а МИК, определенные в нашем исследовании (таблица 1), доказывают активность PGLYRP против бактерий.Кроме того, мы определили MIC PGLYRP для C. trachomatis. В этом случае было обнаружено, что МПК примерно в 20 раз выше, чем для E. coli и B. subtilis. Эти большие значения могут быть связаны с особым образом жизни хламидий. На сегодняшний день известно несколько антимикробных белков и пептидов, обладающих антихламидийной активностью. Несколько исследований показали антихламидийные эффекты иммунных эффекторов хозяина, таких как дефенсины (21–23), кателицидиновый пептид LL-37 (22, 24) и протегрин (23).МИК чистых PGLYRP, полученные в нашем исследовании, могут подтвердить активность PGLYRP против C. trachomatis.

Неизвестно, как PGLYRP убивают C. trachomatis. Поскольку было показано, что PGLYRP связывают липополисахариды различных бактерий (4, 7, 25), они могут связывать хламидийные липополисахариды, которые, как известно, присутствуют как в RB, так и в EB (11). Главный вопрос заключался в том, прикрепляются ли PGLYRP к C. trachomatis. Используя преципитацию и анализ вестерн-блоттинга, мы убедительно продемонстрировали, что PGLYRP напрямую взаимодействуют с C.trachomatis EBs (рис.3).

Мы не знаем точного эффекта PGLYRP на C. trachomatis. Мы обнаружили, что однократный контакт между C. trachomatis и PGLYRPs не только снижает инфекционную способность исходных EB, но также влияет на продукцию инфекционного потомства (рис. 4). Было показано, что мембрана БЭ непроницаема для большинства молекул (крупных белков) (26, 27). Таким образом, маловероятно, что PGLYRP проникают через EB. Кроме того, маловероятно, что PGLYRP действуют изнутри. Вероятно, PGLYRP действуют вне эукариотических клеток, вероятно влияя как на дифференцировку формы EB в форму RB, так и на последующую дифференцировку формы RB обратно в форму EB.

Ранее было показано, что бактериальный стресс-защитный ответ на PGLYRP осуществляется двухкомпонентной системой стрессового ответа (7). TCS обнаруживают транслоцированные внецитоплазматические неправильно свернутые или агрегированные белки (28, 29). Было показано, что связывание PGLYRP с пептидогликаном или липополисахаридами вызывает активацию двухкомпонентной системы ответа на стресс (30). Некоторые бактериальные TCS обладают механизмом аутоактивации (29), который включает активацию экспрессии гена TCS после активации белков TCS.Этим можно объяснить гиперактивацию стрессовой реакции. C. trachomatis также имеет двухкомпонентную систему ответа на стресс (CtcB-CtcC) (15). Мы показали, что контакт PGLYRP с EB C. trachomatis активирует экспрессию генов, кодирующих белки двухкомпонентной системы стресс-ответа. Это может объяснить подавление хламидийной инфекции. Первоначально мы обнаружили два пика, соответствующих высоким уровням мРНК ctcC и ctcB (1 час и 72 часа). 1-часовой пик соответствует активации экспрессии гена TCS после контакта между PGLYRP и EB.Мы также обнаружили небольшое увеличение уровня мРНК через 60 часов, что может быть связано с инициированием высвобождения EB из клеток HeLa. Затем мы обнаружили второй 72-часовой пик, соответствующий максимальному высвобождению ЭБ. Этот пик можно объяснить взаимодействием высвобожденных EB с PGLYRP в культуральной среде во время второго раунда инфекции (31). Кроме того, мы увеличили временное разрешение и обнаружили, что максимальные уровни мРНК ctcC и ctcB были достигнуты через 2 часа после контакта между EB и PGLYRP (рис.5 и 6).

Таким образом, наши результаты демонстрируют антихламидийную активность рекомбинантных человеческих PGLYRP, которая связана с активацией генов, участвующих в хламидийной двухкомпонентной системе ответа на стресс.

БЛАГОДАРНОСТИ

Мы благодарим Сергея Ковальчука (Институт биоорганической химии им. Шемякина-Овчинникова РАН, Москва, Россия), Ольгу Побегуц и Дарью Матушкину (Федеральный научно-клинический центр физико-химической медицины, Москва, Россия). ) для анализа MALDI-TOF.

Это исследование не получало конкретных грантов от какого-либо финансирующего агентства в государственном, коммерческом или некоммерческом секторе.

Экономический консультант Остапенко Роман Иванович

Контактная информация Остапенко Романа Ивановича

Исправления

Все материалы на этом сайте предоставлены соответствующими издателями и авторами. Вы можете помочь исправлять ошибки и упущения. При запросе исправления укажите дескриптор этого элемента: RePEc: ris: statec .См. Общую информацию о том, как исправить материал в RePEc.

По техническим вопросам, касающимся этого материала, или для исправления его авторов, названия, аннотации, библиографической информации или информации для загрузки, обращайтесь: (Роман И. Остапенко). Общие контактные данные провайдера: .

Содержимое

2021, Том 33, Выпуск 1

  • 5-15 Классификация ошибок управления в рамках основных понятий теории целевых систем Корогодина
    Соснин, Эдуард А.И Пойзнер, Борис Н.
  • 16-24 Состояние и направления развития промышленного сектора Сахалинской области Российской Федерации
    по Филобокова Людмила Юрьевна. & Жданкина Александра Ю.
  • 25-39 Экономическое исследование производства кукурузы в некоторых выбранных районах округа Сват
    , выполненное Уддин, Иджаз и Шах, Салман и Хан, Саидулла и Хан, Зульфикар
  • 40-56 Эконометрическое моделирование взаимосвязи сбережений и инвестиций для Ганы
    by Yeboah, Samuel Asuamah & Prempeh, Boateng Kwadwo
  • 57-67 Влияет ли COVID-19 на цену импорта сырой нефти в США?
    от Ахмад, Шакил

2020, том 32, выпуск 4

  • 4-4 «Облако слов» как графическое приложение к научной статье
    автор Остапенко Роман И.
  • 5-15 Исследование и анализ несовершенной конкуренции на российском рынке труда и ее частичное развитие
    Кравцевич, Сергей В.
  • 16-27 Об основах управления аграрной устойчивостью
    Бачев, Грабрин
  • 28-40 Исследование инструментов, влияющих на вовлечение потенциальных клиентов в социальные сети как один из способов повышения эффективности SMM-организаций на примере сообщества Instagram @mebel_rummix
    by Pogorevich, Anastasia V.
  • 41-53 Интернет-магазин: потребительские стратегии студентов
    от Новгородцева, Анастасия Н., Томюк, Ольга Н., Дьячкова, Маргарита А., Пьянкова, Мария П.
  • 54-72 Что определяет инфляцию в Пакистане: исследование посредством моделирования структурным уравнением с использованием данных временных рядов за период с 1975 по 2017 год
    by Uddin, Ijaz
  • 73-82 Состояние теневой экономической деятельности в регионах России
    по Лизина, Ольга Михайловна
  • 83-93 Систематизация правовых источников ЕАЭС в области регулирования рынка услуг в науке
    по Berg, Людмила Н.
  • 94-107 Бюджет, мотивы и стратегии финансовой независимости магистрантов
    by Дьячкова, Анна В., Авраменко, Елена С., Меликова, Мавзуна Х.

2020, Volume 31, Issue 3

  • 4-23 Путь технологических инноваций от пандемии к процветанию: дорожная карта африканской экономики после коронавируса
    by Aduloju, Ayodeji A.И Адедойин, Темитайо А.
  • 24-41 Использование подхода связанного тестирования ARDL для изучения уровня инфляции в Египте
    by Reda Abonazel, Mohamed & Elnabawy, Nourhan
  • 42-52 Оценка значимости системы управления рисками для повышения качества предоставления таможенных услуг
    по Немирова, Гульзида И. и Савельева, Татьяна И.
  • 51-80 Экономические преступления в Ливии: феномен незаконного заработка и отмывания денег до и после революции 17 февраля 2011 года
    by Battal Saleh, Younis A.
  • 81-92 Экоактивизм в социальных сетях и потребительские практики жителей мегаполисов
    от Новгородцева Анастасия Н., Пьянкова Мария П.
  • 93-103 Россия и ВТО: взаимодействие и вопросы безопасности
    by Перевалов, Виктор Д., Берг, Людмила Н., Шерпаев, Владимир И.
  • 104-114 Кейс использования моделирования в обучении бизнес-аналитиков
    Дьячкова Анна В.И Сандлер, Даниил Г., Авраменко, Елена С.
  • 115-124 Проблемы моделирования умной личности - человеческого образа цифровой эпохи
    by Томюк Ольга Н., Дьячкова Маргарита А., Шуталева Анна В.

2020, том 30, выпуск 2

  • 4-12 Риски управленческого контроля на предприятиях сферы услуг
    по Кучумов Артур В., Печерица Елена В., Воронцова Александра М.
  • 13-24 Цифровая трансформация получения данных для экспресс-оценки устойчивого развития региона
    Коноваленков Станислав В.
  • 25-35 Структурно-пространственные приоритеты социально-экономического развития и их реализация на территории Ростовской области (Российская Федерация)
    по Васильева Валентина Сергеевна
  • 36-47 Факторы, влияющие на внебюджетные доходы ведущих российских вузов: эконометрический анализ
    by Sandler, Daniil G. & Gladyrev, Dmitry A.
  • 48-61 Образовательный сегмент современного медиарынка: особенности и тенденции цифровизации
    by Кириллова Наталья Борисовна& Томюк, Ольга Н., Дьячкова, Маргарита А.
  • 62-75 Тенденции и приоритетные направления развития государственной политики в сфере высшего образования на период 2000-2020 годов
    по Кравченко Людмила Александровна, Пашук Наталья Р., Вертинова Анна Александровна, Бедрачук Илья А.
  • 76-88 Человеческий капитал и эффективное развитие
    Егоров Владимир К.

2020, Том 29, Выпуск 1

2019, том 28, выпуск 4

  • 6-13 Определение сущности экономического эффекта от кластеризации и разработка методики его оценки в интересах компаний кластера
    by Belogrud, Anastasia I.
  • 14-20 Технология управления инновационной деятельностью нефтегазовой корпорации
    by Borges, Ageu M.
  • 21-30 Модель динамической оптимизации распределения финансовых ресурсов для ускоренного продвижения в региональное развитие человеческого капитала
    от Мазелис, Лев С., Краско, Андрей А., Красова, Елена В.
  • 31-36 Стратегический консенсус при реализации региональной стратегии
    Терешкина Наталия Е.
  • 37-44 Исследование экспортного кода промышленного развития региональной экономики: идентификация и оценка
    по Мыслякова Ю. Г., Шамова, Елена А., Матушкина, Наталья А.
  • 45-51 Государственные приоритеты развития экспортного сектора экономики Дальнего Востока России: оценка перспектив региональной динамики
    Белоусова Анна Валерьевна
  • 52-61 Последствия деградации российско-украинских отношений для экономики России
    by Ермаков Андрей Р.c & Дмитриева, Наталья Дж., Рубцова, Евгения М.
  • 62-71 Перспективы использования лучшего опыта особых экономических зон России в свободной экономической зоне на территории Республики Крым
    по Ванюшкин Александр Сергеевич, Друзин Руслан В.
  • 72-78 Рентабельность инвестиций в контексте устойчивого развития регионов России
    по Гранадерова Мария Владимировна
  • 79-85 Анализ динамики и причин закрытия юридических лиц в РФ
    по Водопьянова Валентина АлександровнаИ Галицына Виктория С.
  • 86-94 Использование сети Интернет в деятельности торговых предприятий Приморского края
    по Драгилева Людмила Юрьевна. И Драгилев, Игорь Г.
  • 95-99 О долгосрочных тенденциях цен на сырьевые товары: обзор исследований
    by Польщикова Юлия Александровна
  • 100-107 Теоретические основы и проблемы обеспечения экономической безопасности предприятий в контексте политики индустриализации
    по Шуляк Станислав О.
  • 108-113 Надежный мониторинг земель как необходимость выявления структурных изменений по категориям земель на примере Иркутской области
    по Богомолова, Евгения Ю. И Молокова, Дарья М., Бутаков, Кирилл Д.

2019, Том 27, Выпуск 3

2019, Том 26, Выпуск 2

  • 5-21 Место и роль России в мировых процессах импортозамещения
    by Литвинова Алла Валерьевна& Талалаева, Наталья С., Парфенова, Мария В.
  • 22-27 Оценка эффективности государственного регулирования фармацевтической отрасли в России
    по Клунько Наталья Сергеевна
  • 28-36 Методы выявления, оценки и ранжирования финансовых рисков в нефтяной отрасли
    по Гребенникова, Вера А., Баранова, Полина В.
  • 49-54 Криптоиндустрия и платежные системы
    Перцева Светлана Ю.
  • 55-59 Формирование региональной промышленной политики (на примере сыроварни Республики Татарстан)
    Галааутдинова Виктория Владимировна
  • 60-67 Методологические подходы к управлению устойчивым развитием в сельской местности
    по Буторин Сергей Николаевич
  • 68-73 Поворот направлений развития российских веток международных транспортных коридоров в сторону макрорегиона стран АТР
    by Ксенофонтова Татьяна Ю.
  • 83-89 Динамика развития малого и среднего бизнеса: проблемы и перспективы
    по Боркова Елена Александровна, Подкатилина Валерия Александровна, Завьялова Полина Е.
  • 90-97 Актуальные проблемы управления некоммерческими организациями в области профилактики и коррекции общественно опасных форм поведения
    по Клочко Елена Николаевна, Мирончук Вадим Александрович.
  • 98-104 Разработка методических основ оперативного анализа
    по Туфанов Валерий А.И Григигиан, Эрик А.

2019, Том 25, Выпуск 1

  • 5-9 Прогноз финансового состояния нефтяных компаний
    по Болданова Елена Владимировна
  • 10-16 Интернет вещей как дочерняя система
    от Козлов Александр В.
  • 17-24 От поставщиков 5PL к логистике нулевого уровня
    от Кархова, Светлана А.
  • 25-32 Проблемы реализации государственных программ по демографическому и миграционному потенциалу
    по Ростовская Тамара К.И Сигарева Евгения Павловна
  • 33-39 Влияние демографического фактора на региональный рынок труда
    Пухова, Анна Г., Беляева, Татьяна К., Толкунова, Светлана Г., Курбатова, Алла С.
  • 40-44 Организационный климат как психологический фактор влияния на эффективность трудовой деятельности персонала
    по Яшкова Елена Владимировна, Вагин Дмитрий Ю.
  • 45-50 Соотношение платы за сверхнормативное загрязнение окружающей среды с затратами на очистку сточных вод при нефтепереработке
    по Богомолова Евгения Ю.& Кочетова, Ксения А.

2018, том 23, выпуск 3

2018, Том 21, Выпуск 1

2017, Том 20, Выпуск 4

2017, том 19, выпуск 3

2017, том 18, выпуск 2

2016, Том 16, Выпуск 4

2016, Том 13, Выпуск 1

Берхазм Кампания «Любовь есть любовь» - NewsBaza

Новая коллекция от восточноевропейского коллектива Berhasm помогает найти жизненное вдохновение во время пандемии.

«За эти месяцы мы осознали, насколько люди разделяют, мешают взаимопониманию и открытости, мешают самовыражению. По мере того, как вводились новые запреты и меры контроля, мы только более остро осознавали опасность настоящей болезни - болезни отсутствия свободы, неравенства и безразличия. Но и на этот раз нам дали лекарство. Любовь стала таким лекарством от социального дистанцирования и тревожных мыслей, которое смело все границы и ограничения между людьми и дало надежду на новую эру.Эпоха, в которой любовь освобождает ".

Этому посвящена новая коллекция Berhasm. Он посвящен любви без границ, без ограничений, без ограничений, рамок и условностей, которые были так предписаны для всех нас в последние месяцы.



Кредиты кампании:

Режиссер - Бесо Туразашвили
Продюсер - Димитрина Митакова
Стилист - Ирина Скабелкина
Ассистент продюсера - Никита Худяков
Ассистент продюсера - Дмитрий Третьяков
DOP - Слава Фирсов
Фотоаппарат - Алексей Козлова
Фотография - Алексей Козлова
Фотография Бен Клок
Звуковое оформление - Сергей Чуваев
MUA:

Кира Жильцова
Александра Огородникова
Татьяна Тихонова
Полина Матушкина
Лариса Васильева
Ася Перекрест
Особая благодарность Лене Ясенковой
МОДЕЛИ:

Соня Хейфиц
Дмитрий Шугайкин
Галина Сокольская
София Родина
София-Злата Шестаковская
Светлана Март
Константин Похвалин
Егор Бабешко
Анатолий Кулиненко
Рита Косякова
Александр Либерзаков

Пост Кампания Berhasm «Love Is Love» впервые появился на Fucking Young !.

©



Возможно вам понравится

Еврейские библиотеки - Казахстанская ассоциация «Мицва»

тенге
Алматы
Библиотека объединения «Мицва», Еврейский общинный центр и Хэсэд «Полина»
Директор Республиканской еврейской библиотеки Коробкина Галина
Телефон +7 (727) 2735-449, 2730-411
Фонд библиотеки около 9825 наименований
Читательская 1118
Год основания 1993
Город Актобе
Еврейский общинный центр и библиотека Хэсэда Сара
Библиотекарь Ирина Соболева
Телефон +7 (7132) 545-450
Фонд библиотеки 1500 товаров
Читательская 247
Дата основания: июль 2000 г.
Пополнение на 2000 год - 300 новинок
Астана
Еврейский общинный центр и Хэсэд Астана
Библиотекарь А.Ольховская
Телефон +7 (7172) 383-248
Фонд библиотеки 1238 товаров
Читательская 241
Дата основания: август 1997 г.
Пополнение на 2000 год - 220 новинок
г.Атырау
Библиотека Еврейского культурного центра
Библиотекарь волонтер Людмила Токарева
Телефон +7 (71222) 22-24-93
Город Караганда
Еврейский общинный центр Шемеш и библиотека Хэсэда Мириам
Директор библиотеки Лариса Бродская
Телефон +7 (7212) 515-228
Факс +7 (7212) 515-231
Фонд библиотеки 1956 шт.
Читательская 322
Кокшетау Город
Еврейский культурный центр Хатиква и библиотека Хэсэда Натана
Библиотекарь волонтер В.Туменцева
Телефон +7 (3162) 761-281
Фонд библиотеки 1209 товаров
Читательская 364 (+164)
Город Костанай
Библиотека Еврейского культурного центра
Библиотекарь Алла Гафурова
Телефон +7 (142) 530-427
Фонд библиотеки 915 товаров
Читательская 77
Город Кзыл-Орда
Библиотека еврейской общины
Библиотекарь В.Иванова
Телефон +7 (32422) 76-930
Фонд библиотеки 18 предметов
г. Павлодар
Еврейский общинный центр и библиотека Хэсэда Рахель
Директор библиотеки Елена Петрова
Телефон +7 (7182) 383-248
Фонд библиотеки 2116 предметы
Читательская 600
Дата основания: июль 2000 г.
г.Петропавловск
Еврейский общинный центр и библиотека Хэсэда Эфраим
Директор библиотеки Полина Гренадер
Телефон +7 (152) 363-517
Фонд библиотеки 1928 шт.
Читательская 405
Дата основания: июль 2000 г.
Пополнение на 2000-400 новинок
г.Семипалатинск
Библиотека еврейского культурного центра Боккер
Библиотекарь Виктория Батурина
Телефон +7 (222) 565 907
Фонд библиотеки 666 товаров
Читательская 73
Талдыкорган Город
Библиотека Еврейского культурного центра
Библиотекарь Матушкина Диана
Телефон +7 (7282) 25-39-85
Город Тараз
Библиотека Еврейского культурного центра
Библиотекарь Ида Букина
Телефон +7 (7262) 45-14-89
эл. Почта: хэсэд @ таразинфо.
Фонд библиотеки 961 товар
Читательская 500
Город Уральск
Библиотека Еврейского культурного центра
Библиотекарь Елена Певзова
Телефон +7 (112) 242-807
Фонд библиотеки 1885 шт.
Читательская 122
Город Усть-Каменогорск
Еврейский общинный центр и Хэсэд Фаина
Библиотекарь Наталья Куантаева
Телефон / факс +7 (232) 262-514
Фонд библиотеки 1932 шт.
Читательская 450
Дата основания: август 2000 г.
Пополнение на 2000 год - 500 новинок
Город Шымкент
Еврейский общинный центр и библиотека Хэсэда Шимон
Библиотека Светлана Брусиловская
Телефон / факс +7 (252) 576-547
Фонд библиотеки 3062 позиции
Читательская 202

ПОБЕДИТЕЛИ

Мачехин Анатолий Семенович, р.15.12.1926

Мачнева Зинаида Васильевна, д. 29.12.1921

Маканов Тимержан Изельвич, р. 06.11.1918

Макаренко Анна Захаровна, р. 23.02.1925 г.

Макаров Афонасий Михеевич, р. 19.07.1923

Макаров Александр Григорьевич, г.р. 28.05.1918 г.

Макаров Александр Яковлевич, г.р. 23.11.1924 г.

Макаров Андрей Иванович, р. 27.10.1918 г.

Макаров Дмитрий Егорович, р.23.04.1926

Макаров Геннадий Антонович, р. 04.07.1926

Макаров Григорий Иванович, р. 27.01.1927

Макаров Иван Кузьмич, р. 14.08.1913 г.

Макаров Никола Васильевич, г.р. 26.11.1926

Макаров Павел Сергеевич, г.р. 08.06.1923

Макаров Павел Васильевич, р. 22.01.1921

Макаров Петр Константинович, р. 20.07.1925 г.

Макаров Сергей Алексеевич, г.р.12.11.1926

Макаров Василий Иванович, р. 22.02.1926 г.

Макаров Виктор Владимирович, г.р. 07.12.1927

Макаров Владимир Ильич, р. 03.08.1923

Макарова Александра Алексеевна, д. 23.04.1922

Макарова Антонина Михайловна, д. 13.07.1922

Макарова Мария Дмитриевна, д. 25.03.1923 г.

Макарова Нина Семеновна, д. 25.12.1918 г.

Макарова Полина Ивановна, д.03.10.1931

Макарычев Дмитрий Яковлевич, г.р. 30.10.1922

Макеев Степан Илларионович, р. 15.03.1923

Маханова Мария Николаевна, г.р. 20.02.1921

Махнев Андрей Михайлович, р. 16.08.1926

Махнев Константин Васильевич, р. 17.04.1922

Махнев Никола Иванович, р. 25.07.1926 г.

Махнев Никола Тимофеевич, г.р. 05.01.1925

Махнев Сергей Яковлевич, р.01.10.1919

Махнев Владимир Николаевич, г.р. 24.05.1925 г.

Махнева Аврора Гавриловна, д. 25.04.1930 г.

Макин Алексей Павлович, г.р. 19.03.1924

Макин Дмитрий Алексеевич, г.р. 24.10.1914 г.

Макин Семен Андреевич, г.р. 22.08.1922

Маклыгин Анатолий Ефимович, р. 01.01.1925

Маковеев Александр Игнатьевич, г.р. 06.02.1926

Маковеев Иван Афанасьевич, р.08.04.1916

Маковеев Михаил Семенович, р. 02.03.1923

Маковеев Василий Георгиевич, р. 30.11.1924

Маковеев Василий Георгиевич, р. 01.02.1925 г.

Маковеев Василий Игнатьевич, р. 23.12.1920 г.

Маковеева Раиса Семеновна, д. 09.09.1920

Максимов Александр Ксенофонтович, г.р. 22.08.1923

Максимов Александр Михайлович, р. 22.02.1926 г.

Максимов Анатолий Ксенофонтович, р.20.10.1926 г.

Максимов Геннадий Васильевич, р. 13.08.1926

Максимов Иван Александрович, р. 09.04.1926

Максимов Иван Иванович, р. 09.02.1927

Максимов Никола Ильич, р. 20.10.1924 г.

Максимов Никола Никифорович, р. 01.07.1926

Максимов Семен Васильевич, г.р. 08.02.1920 г.

Максимов Виктор Степанович, р. 12.10.1925 г.

Максимов Юрий Иванович, р.24.03.1926

Максимова Мария Ивановна, г.р. 01.04.1923

Макушев Генрих Васильевич, р. 12.07.1927

Малахов Василий Иванович, р. 07.02.1919

Маланин Лев Васильевич, г.р. 29.10.1926

Малаев Тихон Васильевич, р. 23.06.1922

Мальчиков Куприян Федорович, р. 22.08.1918

Малиновский Андрей Александрович, р. 06.01.1927

Малькевич Мария Георгиевна, г.р.30.01.1922

Мальков Андрей Александрович, г.р. 25.09.1925 г.

Малков Аркадий Андрианович, р. 22.07.1927 г.

Мальков Илья Константинович, р. 03.08.1922

Мальков Иван Федорович, р. 02.09.1926

Мальков Иван Степанович, р. 21.06.1925 г.

Мальков Константин Васильевич, р. 22.08.1925 г.

Мальков Леонид Алексеевич, р. 29.07.1926

Мальков Михаил Георгиевич, р.21.11.1925 г.

Мальков Михаил Иванович, р. 24.11.1920 г.

Мальков Михаил Иванович, р. 23.10.1920 г.

Мальков Михаил Иванович, р. 22.11.1922

Мальков Никола Георгиевич, г.р. 05.08.1925

Мальков Никола Иванович, р. 11.12.1922

Мальков Никола Михайлович, р. 22.12.1928 г.

Мальков Никола Николаевич, г.р. 16.10.1915 г.

Мальков Василий Алексеевич, р.19.12.1916

Мальков Василий Андреевич, р. 07.02.1924

Мальков Василий Иванович, р. 24.01.1926

Мальков Василий Михайлович, р. 28.02.1921

Мальков Василий Николаевич, р. 24.02.1925 г.

Малкова Апполинария Михайловна, д. 25.09.1922

Малкова Лидия Павловна, д. 30.03.1924 г.

Малоголовкин Лев Менделевич, р. 27.01.1923

Малоголовкин Лев Менделеевич, р.27.01.1923

Маловская Рафалина Ивановна, д. 02.03.1922

Малоземова Александра Ивановна, г.р. 06.05.1925

Мальшаков Максим Васильевич, г.р. 02.02.1916

Мальшакова Мария Егоровна, р. 18.08.1921

Мальщуков Никола Александрович, р. 13.12.1924

Мальщуков Василий Иванович, р. 24.04.1922

Мальшунин Виктор Алексеевич, р. 16.11.1919

Мальцев Александр Петрович, р.23.08.1917 г.

Мальцев Александр Романович, р. 01.12.1927

Мальцев Алексей Иванович, р. 04.04.1925 г.

Мальцев Анатолий Дементьевич, р. 10.07.1920 г.

Мальцев Анатолий Иванович, р. 19.11.1926

Мальцев Федор Кузьмич, р. 25.09.1906

Мальцев Федор Николаевич, р. 07.01.1924

Мальцев Григорий Тимофеевич, г.р. 21.06.1924

Мальцев Иван Павлович, р.08.10.1923

Мальцев Максим Дмитриевич, р. 20.08.1919

Мальцев Михаил Иванович, р. 01.10.1923

Мальцев Никола Филиппович, р. 17.12.1926

Мальцев Никола Михайлович, р. 11.09.1923

Мальцев Никола Михайлович, р. 22.11.1924

Мальцев Никола Васильевич, г.р. 27.04.1926

Мальцев Павел Николаевич, р. 21.01.1923

Мальцев Петр Евстафьевич, р.15.08.1925 г.

Мальцев Серж Павлович, р. 08.10.1923

Мальцев Василий Петрович, р. 21.07.1924 г.

Мальцев Ефим Исакович, р. 02.02.1918

Мальцев Егор Гаврилович, р. 12.04.1925 г.

Мальцев Евгений Алексеевич, р. 25.01.1926

Мальцева Фаина Ивановна, д. 18.10.1920 г.

Мальцева Клавдия Григорьевна, д. 19.03.1922

Мальцева Людмила Ивановна, р.26.01.1922

Мальцева Надежда Ивановна, д. 03.01.1925

Мальцева Раиса Марковна, д. 09.07.1923

Мальцева Серафима Алексеевна, д. 27.07.1911 г.

Мальцева Екатерина Митрофановна, д. 13.11.1924

Мальцева Зоя Петровна, д. 31.12.1919

Малыгин Анатолий Васильевич, р. 21.04.1922

Малыгин Клавды Михайлович, р. 22.10.1921 г.

Малыгин Клавды Яковлевич, г.р.23.05.1924 г.

Малыгин Михаил Михайлович, р. 14.09.1909

Малыгин Никола Андреевич, г.р. 25.07.1913 г.

Малыгин Семен Петрович, ул. 02.02.1918

Малыгин Василий Иванович, р. 18.09.1926

Малых Александр Иванович, р. 27.04.1924

Малых Александр Николаевич, г.р. 08.01.1924

Малых Алексей Алексеевич, р. 26.02.1915 г.

Малых Алексей Андреевич, р.16.10.1915 г.

Малых Анастасия Ефимовна, р. 30.11.1922

Малых Антонина Ильинична, д. 20.01.1921

Малых Аполлинария Николаевна, р. 22.06.1921

Малых Геннадий Михайлович, р. 06.03.1930

Малых Иван Григорьевич, р. 05.09.1912

Малых Иван Иванович, р. 19.09.1925 г.

Малых Мария Фоминична, г.р. 22.03.1921

Малых Михаил Николаевич, р.12.09.1924

Малых Никола Александрович, г.р. 22.11.1918

Малых Никола Михайлович, р. 31.10.1923 г.

Малых Павел Андреевич, г.р. 21.01.1919

Малых Петр Иванович, р. 15.01.1915

Малых Петр Владимирович, г.р. 12.07.1925 г.

Малых Трифон Максимович, р. 07.02.1923

Малых Василий Петрович, р. 25.10.1925 г.

Малых Виталий Петрович, р.28.02.1921

Малых Юлия Александровна, д. 14.06.1926

Малых Зоя Ивановна, р. 03.02.1920 г.

Малышев Аркадий Максимович, р. 19.10.1925 г.

Малышев Дмитрий Михайлович, г.р. 26.10.1919

Малышев Матве Матвеевич, р. 20.08.1922

Малышев Михаил Васильевич, р. 21.11.1916

Малышев Никола Александрович, г.р. 26.09.1923

Малышев Василий Николаевич, р.12.06.1926

Малышев Владимир Александрович, г.р. 24.10.1930 г.

Малышев Евте Сергеевич, р. 09.01.1924

Малышева Анастасия Алексеевна, р. 03.02.1923

Малышкин Александр Иванович, р. 09.09.1923

Малышкин Василий Михайлович, р. 09.03.1926

Малюгин Леонид Николаевич, р. 31.12.1925 г.

Малюгина Анастасия Михайловна, р. 09.11.1919

Мамаев Анатолий Тимофеевич, г.р.04.11.1922

Мамаев Арсентий Кузьмич, б. 15.05.1923

Мамаев Артемий Александрович, г.р. 21.06.1923

Мамаев Дмитрий Дмитриевич, г.р. 09.10.1925 г.

Мамаев Дмитрий Федорович, р. 05.11.1925

Мамаев Федор Алексеевич, г.р. 27.02.1920 г.

Мамаев Григорий Касьянович, р. 12.01.1921

Мамаев Иван Михайлович, р. 09.05.1922

Мамаев Иван Степанович, р.09.01.1919

Мамаев Иван Яковлевич, р. 08.10.1927

Мамаев Лев Михайлович, г.р. 05.02.1924

Мамаев Михаил Дмитриевич, г.р. 12.11.1924

Мамаев Михаил Федорович, р. 18.11.1925 г.

Мамаев Михаил Иванович, р. 04.11.1921

Мамаев Михаил Константинович, р. 20.03.1925 г.

Мамаев Никола Иванович, р. 05.05.1925

Мамаев Павел Петрович, г.р.25.12.1924 г.

Мамаев Валентин Дмитриевич, г.р. 03.06.1922

Мамаев Василий Андреевич, г.р. 12.03.1923

Мамаев Василий Андреевич, г.р. 27.12.1922

Мамаева Александра Лаврентьевна, д. 11.09.1922

Мамаева Анастасия Васильевна, р. 03.11.1921

Мамаева Антонина Григорьевна, д. 12.04.1922

Мамаева Марфа Михайловна, д. 06.06.1916

Мамаева Валентина Васильевна, д.23.05.1922

Мамчук Иван Федотович, р. 18.08.1925 г.

Мамистова Нина Матвеевна, д. 08.09.1921

Мамонов Никола Трофимович, р. 31.12.1927

Мамонтова Александра Федотовна, р. 20.06.1920 г.

Мамзиков Василий Михайлович, р. 01.03.1924

Манаков Александр Филиппович, р. 26.03.1921

Манаков Никола Акимович, р. 16.12.1927

Манаков Никола Александрович, г.р.20.12.1922

Манаенков Георгий Борисович, р. 01.07.1917

Манихин Григорий Васильевич, р. 22.10.1925 г.

Манихин Иван Федорович, р. 30.07.1923 г.

Манин Дмитрий Иосифович, р. 02.11.1925

Манин Филипп Дмитриевич, р. 27.11.1925 г.

Манин Виктор Петрович, р. 21.09.1925 г.

Манина Анастасия Александровна, д. 23.04.1923

Манина Таисия Дмитриевна, д.27.09.1918 г.

Манылов Алексей Степанович, р. 09.03.1918

Манылов Марк Михайлович, р. 29.11.1912

Манжаров Никола Васильевич, г.р. 21.11.1925 г.

Маракулин Алексей Николаевич, г.р. 23.02.1923 г.

Маракулин Иван Николаевич, р. 26.11.1920 г.

Маракулин Серж Васильевич, г.р. 11.08.1924

Маракулин Виктор Александрович, г.р. 14.09.1918 г.

Маракулина Антонина Ивановна, р.19.12.1923

Маракулина Ольга Дмитриевна, д. 01.07.1916

Марченко Елена Степановна, р. 15.05.1922

Маренин Александр Романович, р. 18.07.1923

Маренин Аркадий Лаврентьевич, г.р. 27.01.1927

Маренин Иван Лаврентьевич, р. 19.07.1924

Маренин Иван Васильевич, р. 06.06.1920

Маренин Виталий Васильевич, р. 11.07.1926

Маренина Татьяна Сергеевна, р.10.01.1924

Мариев Иван Максимович, р. 07.07.1927

Мариева Евдокия Аркадьевна, д. 07.03.1923

Марихин Аркадий Федорович, р. 07.01.1923

Марихин Иван Петрович, р. 21.07.1922

Марихин Клавды Александрович, г.р. 15.05.1919

Марин Александр Георгиевич, г.р. 10.12.1924

Маринченко Александр Степанович, р. 01.12.1920 г.

Маринин Дмитрий Иванович, р.23.09.1923

Маринин Никола Михайлович, р. 14.08.1919

Маринкин Виктор Иванович, р. 28.09.1922

Маркелов Александр Иванович, р. 06.09.1922

Маркелов Иван Федорович, р. 18.06.1924

Маркеевич Анастасия Ивановна, р. 28.01.1923

Марков Александр Андреевич, г.р. 19.08.1925 г.

Марков Алексей Дмитриевич, р. 17.03.1924

Марков Арсений Дмитриевич, р.12.09.1923

Марков Дмитрий Кузьмич, р. 28.10.1924 г.

Марков Иван Афанасьевич, р. 26.10.1919

Марков Михаил Андронович, р. 07.11.1918

Марков Никола Захарович, р. 18.10.1931 г.

Маркова Анна Федоровна, р. 07.08.1923

Маркова Нина Николаевна, г.р. 30.06.1922

Мартемьянов Никола Павлович, г.р. 16.11.1926

Мартиросян Рипсик Минасовна, д.01.03.1923

Мартьянов Алексей Павлович, р. 13.03.1927

Мартьянов Алексей Павлович, р. 22.11.1925 г.

Мартьянов Алексей Васильевич, р. 21.02.1926 г.

Мартьянов Борис Иванович, р. 30.11.1927

Мартьянов Иван Васильевич, р. 19.03.1925 г.

Мартьянов Михаил Федорович, р. 07.11.1922

Мартьянов Павел Семенович, р. 10.02.1922

Мартьянов Сергей Григорьевич, р.05.10.1924

Мартьянов Сергей Михайлович, г.р. 11.09.1915

Мартьянов Степан Яковлевич, р. 20.08.1926

Мартьянова Татьяна Архиповна, р. 01.07.1920 г.

Мартынов Борис Иванович, р. 05.12.1923

Мартынов Иван Петрович, р. 26.10.1922

Мартынов Михаил Иванович, р. 13.09.1924

Мартынов Василий Иванович, р. 14.02.1924 г.

Мартынов Виктор Михайлович, р.20.11.1921

Мартынова Татьяна Васильевна, р. 15.01.1927

Мартынюк Никола Федорович, р. 05.02.1922

Марьин Алексей Поликарпович, р. 07.02.1926

Марьин Анатолий Дмитриевич, р. 23.07.1926 г.

Марьин Анатолий Петрович, р. 03.02.1931

Марьин Павел Дмитриевич, р. 19.08.1926

Марьин Сергей Федорович, р. 23.01.1931

Марьина Мария Сергеевна, р.30.12.1923

Марышев Михаил Матвеевич, р. 09.10.1918 г.

Марюкова Васса Степановна, д. 15.08.1922

Машатин Никола Егорович, р. 27.03.1924 г.

Машина Манефа Андреевна, д. 13.11.1922

Машкин Александр Алексеевич, г.р. 02.05.1931

Машкин Александр Петрович, р. 01.05.1925 г.

Машкин Геннадий Федорович, р. 24.12.1925 г.

Машкин Никола Алексеевич, р.16.05.1923 г.

Машкин Сергей Иванович, р. 26.04.1916

Машкин Евгений Филиппович, р. 21.10.1928 г.

Машкина Валентина Васильевна, р. 30.06.1921

Машковцев Аркадий Васильевич, р. 27.11.1924

Машковцев Григорий Васильевич, р. 11.02.1915

Машковцев Никола Михайлович, р. 23.05.1920 г.

Машковцев Василий Андреевич, р. 22.02.1925 г.

Машковцев Владимир Федорович, р.03.12.1922

Маскалев Яков Михайлович, р. 30.05.1918 г.

Маских Василий Александрович, р. 09.06.1926

Масленников Александр Алексеевич, г.р. 26.07.1923 г.

Масленников Александр Гаврилович, р. 22.02.1922 г.

Масленников Александр Иванович, р. 08.08.1926

Масленников Анатолий Семенович, р. 20.07.1925 г.

Масленников Борис Никонорович, р. 19.06.1926

Масленников Михаил Федорович, р. 09.10.1923

Масленников Петр Васильевич, р. 07.01.1922

Масленников Степан Дмитриевич, р. 25.01.1919

Масленников Василий Михайлович, р. 28.08.1922

Масленникова Анна Алексеевна, р. 05.05.1918

Масленникова Нина Васильевна, р. 06.05.1925

Масленникова Елизавета Васильевна, р. 23.08.1916 г.

Маслов Петр Николаевич, г.р.08.02.1913

Маслов Василий Михайлович, р. 26.12.1923

Маслов Вениамин Кириллович, р. 27.10.1925 г.

Маслова Мария Николаевна, г.р. 08.03.1924

Маслова Мария Прокопьевна, д. 14.08.1923

Маслова Валентина Тимофеевна, г.р. 25.06.1922

Масловская Зинаида Васильевна, д. 17.10.1920 г.

Матанцев Андрей Михайлович, р. 26.08.1918

Матанцев Аркадий Николаевич, р.24.01.1931

Матанцев Иван Николаевич, р.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *