Анастасия стеценко: София Стеценко – биография, личная жизнь, фото, новости, актриса, сериал «Сваты», «Инстаграм» 2021

София Стеценко – биография, личная жизнь, фото, новости, актриса, сериал «Сваты», «Инстаграм» 2021

Биография

Украинская актриса София Стеценко прославилась еще в 6-летнем возрасте, сыграв забавную внучку в популярном семейном телесериале «Сваты». Позднее у юной талантливой артистки была главная роль и интересные образы в нескольких картинах.

Детство Софии Стеценко

Биография Софии берет начало в 2003 году. Несмотря на то, что будущая звезда телеэкранов родилась в День смеха и имеет веселый и жизнерадостный характер, родители ребенка Светлана и Сергей Стеценко отмечают: дочь с ранних лет серьезно отнеслась к мечте стать актрисой.

До Софии в семье никто к кинематографу, как и к любому другому виду искусства, отношения не имел, если не считать того, что одна из бабушек пела в любительском хоре. Старший брат, которого, как и отца, зовут Сергей, пошел в актерскую профессию только после невероятного успеха сестры, хотя мать мечтала увидеть сына на дипломатической должности.

#актеры София Стеценко С 5-ти лет занимается в студии театра «Fantasy new» (Киев), где уже сыграла роли Пираточки в «Питере Пене», Митиль в «Синей птице» http://lifeactor.ru/2739-sofiya-stecenko.html

Posted by Актеры on Thursday, June 19, 2014

София Стеценко в детстве

В 5 лет Стеценко стала учиться в киевской детской студии при театре Fantasy New под предводительством Татьяны Погребняк и через несколько месяцев получила роль маленькой пиратки в спектакле «Питер Пен». Затем у нее были главные роли в постановках «Синяя птица», где она сыграла Метель, и «Маленький принц», в которой талантливая артистка преобразилась в инопланетного принца, прибывшего на Землю.

Еще София наряжалась в Пеппи Длинныйчулок, но не в театральной пьесе, а в детском конкурсе эстрадного творчества «Леди и джентльмены». Там Соня Стеценко заняла 1-е место, получила Гран-при и сумела обратить на себя внимание агента, которая подыскивала юных актеров для участия в сериале «Сваты».

Продюсировал этот проект человек, который в то время числился художественным руководителем студии «Квартал 95» — Владимир Зеленский, ставший в 2019 году президентом Украины.

Фильмы

Еще на театральных репетициях София Стеценко сумела развить память до оптимального уровня и воспитала в себе дисциплинированность. Рожденная под знаком зодиака Овен артистичная девочка была очень упорной и трудолюбивой. Эти качества помогли Соне, когда она сменила в знаменитом многосерийном фильме Ульяну Иващенко.

Когда дошкольница стала сниматься в кино, весь актерский состав был поражен тем, как маленькая София моментально заучивала реплики и как стойко держалась на съемочной площадке, на которой приходилось работать с 7 утра и до 23 часов вечера.

При этом она ни разу не пожаловалась на усталость, не тушевалась перед камерами и гармонично вписалась в коллектив прославленных звезд. Ведь рядом с дошкольницей снимались Людмила Артемьева, Анатолий Васильев и Татьяна Кравченко. Но больше всего София подружилась с экранным дедушкой Ваней, которого играл Федор Добронравов, и с экранным соседом Митяем, чей образ воссоздал Николай Добрынин. По словам Сони, с коллегами из «Сватов» она общается до сих пор.

Анна Кошмал и София Стеценко

Posted by Студия «Квартал 95» on Friday, April 27, 2012

Анна Кошмал и София Стеценко

Стеценко снялась в 3-м и 4-м сезонах «Сватов», а позднее изображала внучку Женю Ковалеву в полнометражной комедии «Новогодние сваты» и телевизионной кулинарной передаче «Сваты у плиты» на украинском телеканале. В шоу Стеценко трудилась на кухне наравне со взрослыми. Телевнучку приглашали и в качестве гостя на такие передачи, как «Большая разница».

Еще выходила документальная лента об исполнителях любимого зрителями сериала под названием «Сваты: жизнь без грима». В 5-й части хита Софию сменила артистка Анна Кошмал. Стоит добавить, что в этой многосерийной ленте, давшей юной актрисе путевку в жизнь, Соня дебютировала и как певица, исполнив песню «Цветочек».

Работа в кино для Софии Стеценко не ограничивалась одними «Сватами». Фильмография Сони для ее возраста достаточно приличная. Маленькая звезда в 2009 году появлялась вместе с Олесей Железняк и Аленой Яковлевой в романтической комедии «Чудо». Восьмисерийная картина о беременной девушке, слышащей голос еще не рожденного ребенка, вызвала одобрение зрителей. Режиссером выступил Олег Асадулин. Помимо Железняк и Яковлевой, в картине снялись Леонид Громов, Владимир Стержаков, Никита Емшанов, Кирилл Сафронов и другие.

София Стеценко и Федор Добронравов в сериале «Сваты»

Железняк исполнила роль богатой женщины Ани, прожигательницы жизни в 30 лет. Внезапная беременность ставит все с ног на голову, и тусовщица решается на аборт. Тогда на приеме врача в голове Анны раздается голос плода, и героиня Софии сбегает с процедуры. Благодаря этому она взрослеет, умнеет, учится брать на себя ответственность. Соня снялась в эпизоде. Персонажем юной звезды стала девочка с робокопом.

Позднее актрису задействовали в работе на съемочной площадке с Кариной Андоленко и Агнией Кузнецовой в мелодраме «Арифметика подлости». София сыграла одну из героинь в детстве.

Эта картина о перипетиях судьбы: две девушки, кажущиеся подругами, на деле являются врагами, хотя знает об этом пока только одна.

В 2011 году Стеценко появилась в спортивном фильме «Чемпионы из подворотни» с Дмитрием Певцовым и Иваном Добронравовым.

София Стеценко и Александр Невзоров

Сюжет картины основан на реальных событиях, произошедших в Италии в 2009 году. Тогда на чемпионате мира по пляжному футболу украинская сборная людей без определенного места жительства дошла до финала турнира. У бродяг, желающих остаться в Португалии, вдруг проснулось чувство патриотизма. Они разгромили соперников и стали чемпионами.

В ленте задействовали Елену Шамову, сыгравшую возлюбленную Певцова, — Оксану; Александра Кобзаря, ставшего вратарем сборной; Алексея Горбунова, перевоплотившегося в тренера команды, и других. Соня исполнила роль Оксаны в детстве.

Стеценко сыграла с Яной Соболевской и Павлом Баршаком в психологической драме «Под прицелом любви» в 2012 году. Героиню Софии звали Настя Соловьёва.

Сюжет фильма развернулся после загадочной смерти дочери бизнесмена Ани Власовой. Сестра карьеристки Кира уверена, что Анна не могла свести счеты с жизнью, и начинает собственное расследование. Это приводит к череде смертей, и жизнь Киры оказывается под угрозой.

София Стеценко и Ульяна Иващенко/ Кадры из сериала «Сваты»

На счету маленькой артистки комедия 2011 года «Ласточкино гнездо», в которой София Стеценко разделила главные роли с Даниилом Белых и Артемом Семакиным.

Персонаж Сони — девочка Маша, потерявшая мать. Тогда за опеку ребенка берутся соседи и подруга матери. Но Маша хочет найти родного отца. Только из имеющихся данных у нее есть фото и сведения о двух возможных кандидатах в отцы.

Особо можно отметить такие работы Софии, как мелодраму 2012 года «Полет бабочки», в которой она сыграла роль дочери главной героини, и семейную историю «Я рядом», где Стеценко изобразила персонажа актрисы Алины Сергеевой в 12-летнем возрасте.

Последними фильмами Софии Стеценко стали лирическая комедия «Ищу жену с ребенком» и получившая хорошие рейтинги мелодрама «Ради любви я все смогу». В этих проектах Соня поработала со звездами российского и украинского экрана в 2015 году. После было несколько работ в рекламных роликах, но они не добавили актерской славы.

Личная жизнь

Сегодня София уже окончила киевскую гимназию, где подружилась со многими учениками, благодаря своему приветливому характеру. В этой школе были маленькие классы, ребята участвовали в театральных постановках и даже снимались в кино, поэтому не проявляли зависть к успехам друг друга.

Романтические отношения пока не вскружили голову, поэтому личная жизнь совсем еще молодой Сони впереди. Во всяком случае, миниатюрная голубоглазая актриса (рост 157 см, а вес — 45 кг) не афиширует возможные отношения.

Как и другие современные ребята, Соня ведет микроблог в «Инстаграме» и страничку во «ВКонтакте». Там София Стеценко делилась с подписчиками личными фото, снимками своей крысы по имени Соломон и красивыми кадрами повседневной жизни.

С 2016 года она некоторое время не уделяла внимания соцсетям. По мнению прессы, это могло быть связано с тем, что звезду «Сватов» очень расстраивали фейковые страницы актрисы в интернете. В конце 2020 года в инстаграм-аккаунте Софии не так много снимков и видеороликов, как у многих сверстниц. Куда более активно Стеценко ведет себя в другой социальной сети.

София Стеценко сейчас

В 2020 году Соня не появляется на экране в премьерах. Сейчас киевлянка служит в учебном театре ГИТИС.

На странице во «ВКонтакте» София указала данные своего агента. Там же в декабре 2017 года она написала, что снимается в новом фильме, однако информацию о проекте и воплощаемой роли не указала.

София Стеценко сейчас

Но журналисты еще вспоминают забавную Женю из «Сватов». Главным образом — в контексте взросления Стеценко. В русоволосой красавице мало кто узнает телеэкранную внучку. Сериал полюбился в странах СНГ, поэтому периодически трансляции повторяются. Это возобновляет интерес зрителей к актерам — поклонники ленты любопытствуют: «Как Анна Полищук, Соня Стеценко, Константин Чернокрылюк и другие выглядят сейчас?».

Внимание пользователей Сети дает и неприятный эффект. В мае 2020 года поклонники задали Софии вопрос на ее странице во «Вконтакте» — есть ли у нее родственная связь с тиктокером Sasha_Pklva, которая называла себя сестрой Стеценко. Знаменитость дала отрицательный ответ.

Фильмография

• 2009 – «Сваты 3»
• 2010 – «Сваты 4»
• 2010 – «Новогодние сваты»
• 2011 – «Чемпионы из подворотни»
• 2011 – «Ласточкино гнездо»
• 2012 – «Под прицелом любви»
• 2013 – «Я рядом»
• 2013 – «Полет бабочки»
• 2014 – «Ищу жену с ребенком»
• 2015 – «Ради любви я все смогу»

Стеценко Анастасія — выступления в пауэрлифтинге и жиме лежа, рекорды, личные данные, фото и видео

	Соревнование				#	Категория	Вес	Возраст	П	Ж	Т	Сумма	Дивизион
	Федерация	Год	Дата	Откуда
	Кубок Украины по пауэрлифтингу				1	75	68,35	T2	120,0	62,5	115,0	297,5	б/э
	UPC	2019	12 — 13 окт	Киев
	Кубок Украины по пауэрлифтингу				1	75	68,35	T2	—	62,5	115,0	—	б/э
	UPC	2019	12 — 13 окт	Киев
	Кубок Украины по пауэрлифтингу				1	75	68,35	T2	120,0	—	—	—	б/э
	UPC	2019	12 — 13 окт	Киев
	Кубок Украины по пауэрлифтингу				1	75	68,35	T2	—	62,5	—	—	б/э
	UPC	2019	12 — 13 окт	Киев
	Кубок Украины по пауэрлифтингу				1	75	68,35	T2	—	—	115,0	—	б/э
	UPC	2019	12 — 13 окт	Киев
	Чемпионат Украины по пауэрлифтингу 2019				1	67,5	67,10	T2	110,0	57,5	115,0	282,5	б/э
	UPC	2019	13 — 14 апр	Киев
	Чемпионат Украины по пауэрлифтингу 2019				1	67,5	67,10	T2	—	57,5	115,0	—	б/э
	UPC	2019	13 — 14 апр	Киев
	Чемпионат Украины по пауэрлифтингу 2019				1	67,5	67,10	T2	110,0	—	—	—	б/э
	UPC	2019	13 — 14 апр	Киев
	Чемпионат Украины по пауэрлифтингу 2019				1	67,5	67,10	T2	—	57,5	—	—	б/э
	UPC	2019	13 — 14 апр	Киев
	Чемпионат Украины по пауэрлифтингу 2019				1	67,5	67,10	T2	—	—	115,0	—	б/э
	UPC	2019	13 — 14 апр	Киев
	GPA-GPA-D World Championship 2018				1	67,5	67,30	T1	105,0	60,0	110,0	275,0	б/э
	GPA	2018	23 — 25 ноя	Киев
	GPA-GPA-D World Championship 2018				1	67,5	67,30	T1	—	60,0	—	—	б/э
	GPA	2018	23 — 25 ноя	Киев
	GPA-GPA-D World Championship 2018				1	67,5	67,30	T1	105,0	60,0	110,0	275,0	б/э
	UPC	2018	23 — 25 ноя	Киев
	GPA-GPA-D World Championship 2018				1	67,5	67,30	T1	—	60,0	—	—	б/э
	UPC	2018	23 — 25 ноя	Киев
	Чемпионат Украины по пауэрлифтингу и отдельным упражнениям				1	67,5	67,20	T1	97,5	57,5	97,5	252,5	б/э
	UPC	2018	20 — 21 апр	Киев
	GPA-GPA-D EURO CUP				1	67,5	66,80	T1	92,5	55,0	95,0	242,5	б/э
	GPA	2017	11 — 12 ноя	Киев
	GPA-GPA-D EURO CUP				1	67,5	66,80	T1	92,5	55,0	95,0	242,5	б/э
	UPC	2017	11 — 12 ноя	Киев
	Кубок Украины по пауэрлифтингу и отдельным упражнениям				—	75	68,80	T1	—	—	—	—	б/э
	UPC	2017	6 — 8 окт	Киев
	Чемпионат Украины по пауэрлифтингу и отдельным упражнениям				1	75	68,60	T1	—	52,5	—	—	б/э
	UPC	2017	8 — 9 апр	Киев

Анастасия Стеценко ВКонтакте, id9626902

Подслушано МПГУ
Здесь вы можете поделиться любыми секретами, мемами и вопросами, имеющими то или иное отношение к МПГУ. Анонимность гарантируется ✔ Как добавить пост? Отправьте пост в «Предложить новость» сообщества. Запись опубликуется без вашего авторства, само собой. По вопросам сотрудничества обращаться к [id260225978|Бонифацию Дусевичу]!

Давай лучше дома посмотрим

Строки пыльных книг

Концептуальный вандализм | КВ
street art лидер в России, но не всегда только street art ██ █ ████ куратор и владелец: instagram. com/true_conceptual_vandalism/ ITUNES https://vk.cc/9iihXY Мы хотим жить в стране со свободными стенами и дешевой краской

ЧЕСТЕР НЕБРО…
Честер Небро — этого тольяттинского поэта, рэпера и битмаря зовут Дмитрий. Дмитрий не очень любит распространяться о себе и, поэтому, информацию о нем можно услышать только лишь из его трэков. Известно о нем немного, Дмитрий увлекался в детстве футболом, позже под «воздействием» французского рэпа и тольяттинского андера совместно с Архимедом и Диезом в 2005 году создал группу Небро. На счету группы 5 альбомов: «Без Бритвы» 2008 «Я читаю хопчик» — EP 2009 «Shitmakers» 2010 «А начиналось все нормально» (Single)2010 «Н. А.» 2011 С фитами: Абаз, Арти, Мяка АКМ, Base (Небездари), Рома Radik, Саша Маставой, Артем Татищевский, Полумягкие, Mesr, Эскимо, Космонавты, Мавр. В настоящий момент в группе 2 участника это Архимед и Честер, новых работ с 2011 года у группы нет. С 2012 года Честер ведет сольную карьеру и выпускает: «Черти» 2012 «Черти Том 2 Чесночные головы»2013 «ChilaRap» 2014 «Черный» 2015 «Караван» 2017 С фитами: Абаз, Типси Тип, Грязный Луи. Однако в последнее время Честер уходит от фитов и записывает исключительно сольные альбомы на свою музыку.

Подслушано Метро Москвы
Невероятный микс из всего самого лучшего, что присылают нам подписчики о Московском метро. Обратите своё внимание, что на стене публикуются записи только с качественной фотографией человека, которого вы ищете. Для тех, кто не смог сделать такую фотографию по разным причинам, есть обсуждения группы — vk.com/board144260965.

Подслушано в Хогвартсе | Гарри Поттер ϟ
Что происходит в стенах Хогвартса? Вероятно, единственной в мире школе магии. Обучение начинается в 11 лет и длится 7 лет. В конце каждого года сдаются экзамены, но особенно важны для будущего учеников экзамены в конце 5-го и 7-го года обучения. Количество учеников точно неизвестно

C h o p — C h o p
Кормим только годными постами.

Шедевры рекламы
У нас всё самое вкусное из мира рекламы! Глазами потребителей – учимся видеть то, что скрыто. С точки зрения маркетологов – изучаем нейромаркетинг, дизайн и креатив. Через призму предпринимателей – разбираем эффективные приемы и техники.

B A C A R D I
И только если сам Иисус пришёл и сказал тебе, что вот эту картинку необходимо срочно запостить в † B A C A R D I, или слышишь трек, что явно от Иисуса, тогда и только тогда предлагай пост нам!

СУР
Слегка упоротая редакция Присылайте новости в предложку с пруфами. Наша телега:

контур гуся
абсурдные мемы и не только

Тысяча чертей, какая татуировка!
Тысяча чертей, какая татуировка — крупнейшее сообщество о татуировке в России! Мы за красоту и против стереотипов. Присоединяйся к нам, чтобы всегда быть в курсе самого интересного из мира татуировок 😉

Я люблю русский язык!
Наши книги и карточки на «Лабиринте» 👇

Мир Дизайна
Все о мире дизайна! Ты найдешь для себя много полезных идей и конечно же — вдохновение на каждый день, только самое интересное! Cледи за тегами: Для творчества 👉#хендмейд@design_is Для красивой квартиры 👉 #дизайн_интерьера@design_is Для вдохновения и мотивации 👉#цитаты@design_is

Котий
Мемы и шуточки с котиками

Анастасия Стеценко, Киев, Украина

Личная информация

Деятельность

скрыта или не указана

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

Интересы

скрыты или не указаны

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

Любимая музыка

скрыта или не указана

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

Любимые фильмы

скрыты или не указаны

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

Любимые телешоу

скрыты или не указаны

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

Любимые книги

скрыты или не указаны

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

Любимые игры

скрыты или не указаны

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

Любимые цитаты

скрыты или не указаны

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

О себе

скрыто или не указано

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

Анастасия Стеценко, 32 года, Новый Уренгой, Россия

Личная информация

Деятельность

скрыта или не указана

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

Интересы

скрыты или не указаны

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

Любимая музыка

скрыта или не указана

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

Любимые фильмы

скрыты или не указаны

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

Любимые телешоу

скрыты или не указаны

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

Любимые книги

скрыты или не указаны

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

Любимые игры

скрыты или не указаны

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

Любимые цитаты

скрыты или не указаны

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

О себе

скрыто или не указано

Можно редактировать: да

Обязательно к заполнению: нет

Можно скрыть настройками приватности: да

---

Анастасия Стеценко, страница 4

Вы искали:

Нашлось 249 человек(а)

Страна проживания: Украина
Город: Сумы
Родом из города: Кому нада знает
Дата рождения: 8 октября
Среднее образование:
Школа: Школа №7 Сумы ( 4)

Подробнее

Страна проживания: Россия
Город: Новочеркасск
Среднее образование:
Школа: Школа №25 Новочеркасск
Телефон: 89518404728
Текущая деятельность: Школа №25

Подробнее

Страна проживания: Россия
Город: Курганинск
Родом из города: Темиргоевская
Дата рождения: 9 января
Телефон: 898983*7278
Skype: anastasiya. stetsenko2

Подробнее

Страна проживания: Россия
Город: Краснодар
Родом из города: ст.Темиргоевская
Среднее образование:
Школа: Гимназия № 1 , 2018 Краснодар (б)
Телефон: 7-2-14
Skype: igor97453

Подробнее

Страна проживания: Россия
Город: Москва
Высшее образование:
Вуз: МГОУ им. В. С. Черномырдина (ныне в сост. МАМИ) , 2006 , Студентка (бакалавр)
Текущая деятельность: МГОУ им. Черномырдина (ныне в сост. МАМИ) (бывш. ВЗПИ)

Подробнее

Адрес страницы: Реклама

Страна проживания: Россия
Город: Новомосковск
Родом из города: Гремячее
Дата рождения: 1 марта
Среднее образование:
Школа: Гремячевская средняя школа Гремячее

Подробнее

Страна проживания: Украина
Город: Донецк
Родом из города: Донецк
Дата рождения: 4 сентября
Среднее образование:
Школа: Школа № 112 Донецк
2011 (б)

Подробнее

Страна проживания: Россия
Город: Электросталь
Родом из города: Электросталь
Высшее образование:
Вуз: Филиал РГСУ , 2012 , Выпускница (специалист)
Текущая деятельность: РГСУ (ЭФ)

Подробнее

Страна проживания: Украина
Город: Желтые Воды
Родом из города: Желтые Воды
Дата рождения: 8 августа
Среднее образование:
Школа: Школа №6 , 2002 Желтые Воды (в)

Подробнее

Страна проживания: Россия
Город: Егорьевск
Дата рождения: 27 сентября 1994
Среднее образование:
Школа: Промышленно-экономический техникум (ЕПЭТ) Егорьевск

Подробнее

София Стеценко. Как изменилась маленькая Женечка из Сватов | Дотянуться до звезды

София Стеценко родилась 1 апреля 2002 года в украинском городе Киеве. А как мы все помним 1 апреля — это день смеха. Сейчас она уже настоящая девушка, ей 17 лет.

Любопытно, что никто из ее родителей не причастен к актерской деятельности. Только старший брат, который ходил в театральную студию ещё до того, как туда пошла София. Мама, забирая сына из студии, брала Софию с собой. Там они порою ждали мальчика и девочка приметилась руководству театра. Директор театральной студии называла маленькую девочку антистрессом и самым неплачущим ребенок. Руководитель театральной студии, Татьяна Погребняк, сама предложила девочке походить к ним в студию, что бы зря время не просиживать. И уже через пару месяцев девочка выступала на сцене в самых разных постановках.

С мамой

С мамой

Первый гран-при София взяла на конкурсе «Леди и джентльмены Украины», где она выступала в образе Пеппи Длинныйчулок. Она спела две сложнейшие песни Пеппи, активно играла с взрослыми актерами. Жюри смотрело на нее открыв рот. София взяла первое место.

По очень счастливому стечению обстоятельств на конкурсе была девушка-агент, ответственная за кастинг на детские роли в сериал «Сваты», так Яценко получила приглашение на кастинг, который прошла с блеском. Как, между прочим, и ее коллега по театральному цеху из той же студии Сашей Невзоровым, которому дали роль Лехи.

Как-то Софии задали вопрос, что больше всего не нравилось на съёмках «Сватов». Ответ был очень забавным. Ей не нравилось, что приходилось есть, то, что она не любит. К примеру она не могла принципиально есть сосиски, ей не нравились пироги, соленые огурцы и помидоры, квашеная капуста. Режиссер говорил ей, что бы она поворачивалась, кусала и делала вид, что ест. Но София смогла себя преодолеть и всё-таки стала есть по-настоящему, правда не сразу, понадобился не один месяц.

На вопрос кто ее любимый актер, с кем бы она хотела сыграть, девочка, не раздумывая, отвечает — Боярский. Фильмы с его участием она пересматривает постоянно.

Многие завидуют Софии, говорят, что ей повезло сняться в таком популярном сериале. Но мало кто знает, что на несколько лет съёмок и репетиций она попрощалась с днями рождения родных и друзей, с полноценными выходными. Все весной на шашлык, а она на репетицию. Летом все на море, а она на съёмку.

Коллеги по съемочному цеху в сериале Сваты по отечески полюбили девочку, особенно она сошлась со своим киношным дедушкой Ваней (Федор Добронравов).

Девочка много рассказывала на съёмках про свой украинский театр, да так ярко, что Татьяна Кравченко (в сериале — Валентина) решила дать на развитие театра денег. Руководитель театра была очень тронута этим поступком, она была искренне восхищена и не понимала, как она могла так поступить, не зная театр лично, а только по рассказам маленькой девочки.

Ещё актёры и съёмочная группа «Сватов» отмечала невероятную работоспособность ребенка. Она могла работать с 8 утра до 11 вечера. Могла без труда выучить требуемый текст.

Карьера маленькой девочки сложилась очень успешно. Поэтому сейчас она имеет полное право взять перерыв и отдаться учебе, тем более в какой-то период времени она была не на первом месте. Сейчас девочка готовится к поступлению в ВУЗ. Будет ли это театральный, пока не известно, но скоро увидим. В любом случае, она уже актриса.

К сожалению, из-за трудностей российско-украинских отношений, даже если София и станет актрисой, в российском кино мы увидим ее только, когда эти трудности разрешатся.

После Сватов она снялась ещё в нескольких полнометражных фильмах. В 2017 году Стеценко объявила об участие в новом проекте, но широкой публике он так и не был представлен.

DANCEPLAZA.COM — [ПЕРВЫЙ ПАНЕЛЬ]

900 90 034 900 05 WDSF World Open Ns Standard — Брно, Чехия (1)

Онлайн: 24 года 6 месяцев и 7 дней Plaza Result Service
Поиск :: ВСЕ результаты :: Сравнить
Воскресенье, 25 апреля 2021 г.
04-25	WDSF Open Latin — Borgoricco Italy (1)
Суббота, 24 апреля 2021 г.
04-24	Открытый стандарт WDSF — Borgoricco, Италия (1)
Воскресенье, 21 февраля 2021 г.
02-21	WDSF Open Latin — Molinella (BO) Италия (1 )
Суббота, 20 февраля 2021 г.
02-20	Открытый стандарт WDSF — Molinella (BO) Италия (1)
Воскресенье, 4 октября 2020 г.
10-04	Nk 2020 — Далфсен Нидерланды (42)
Воскресенье, 20 сентября 2020 г.
09-20	Стандарт WDSF для молодежи до 21 года — Шяуляй, Литва (1)
09-20	WDSF Youth Open Latin — Шяуляй, Литва (1)
Суббота, 19 сентября 2020 г.
09-19	WDSF Youth Under 21 Open Latin — Шяуляй, Литва (1)
09-19	Молодежный открытый стандарт WDSF — Шяуляй Литва (1)
09-19	Чемпионат Европы WDSF Ten Dance — Орхус, Дания (1)
Воскресенье, 8 марта 2020 г.
03-08	WDSF International Open Latin — Красногорск Россия (1)
03-08	WDSF Youth Open Latin — Красногорск Россия (1)
03-08
03-08	WDSF Youth Open Latin — Брно, Чехия (1)
03-08	WDSF Youth Open Standard — Брно, Чешская Республика (1)
Суббота, 7 марта 2020 г.
03-07	WDSF Senior Ii Open Standard — Мальта Мальта (1)
03-07	Международный открытый стандарт WDSF — Мальта Мальта (1)
03-07	WDSF Open Ten Dance — Мальта Мальта (1)
03-07	Молодежный чемпионат Европы по теннису WDSF — Брно, Чешская Республика (1)
03- 07	WDSF Youth Open Latin — Мальта Мальта (1)
03-07	WDSF Senior III Open Standard — Мальта Мальта (1)
03-07	WDSF Youth Open Standard — Мальта Мальта ( 1)
03- 07	Международный открытый стандарт WDSF — Красногорск Россия (1)
03-07	Открытый стандарт WDSF Senior I — Брно, Чехия (1)
03-07	WDSF Senior I Open Latin — Мальта Мальта (1)
Показать еще

Фамилия Стеценко

Имена для Стеценко

• Михаил Стеценко 4
• Ирина Стеценко 4
• Ирена Стеценко 4
• Ира Стеценко 4
• Инна Стеценко 4
• Илона Стеценко 4
• Илона Стеценко 4len
• Илона Стеценко 4 4
• Галина Стеценко 4
• Георгий Стеценко 4
• Галя Стеценко 4
• Галина Стеценко 4
• Татьяна Стеценко 3
• Ольга Стеценко 3
• Стеценко Александр Стеценко 6 3
9023 2
• Юрий Стеценко 2
• Юрий Стеценко 2
• Юрий Стеценко 2
• Юрий Стеценко 2
• Юлия Стеценко 2
• Юлиана Стеценко 2
• Ярослав Стеценко 2
• Ярослав Стеценко 2
• Ярослав Стеценко 2
• Ярослав Стеценко 2
• Стеценко Владимир 2
• Владислав Стеценко 2
• Влад Стеценко 2
• Владислав Стеценко 2
• Владислава Стеценко 2
• Владимир Стеценко 2
• Виталий Стеценко 2
• Виталий Стеценко 2
• Виталий Стеценко 2
• Виталий Стеценко 2
• Виталий Стеценко 2
• Виталий Стеценко 2
• Виталий Стеценко 2
• Виктория Стеценко 2
• Вика Стеценко 2
• Виктория Стеценко 2
• Вероника Стеценко 2
• Вера Стеценко 2
• Василий Стеценко 2
• Василий Стеценко 2
• Валерия Стеценко 2
• Валерия Стеценко 2
• Валерия
• Валерия Стеценко 2
• Валерия Вадим Стеценко 2
• Ульяна Стеценко 2
• Тоня Стеценко 2
• Тимур Стеценко 2
• Татьяна Стеценко 2
• Татьяна Стеценко 2
• Тарас Стеценко 2
9023 9023 Стеценко 2ха Тамара Стеценко 2
• Светлана Стеценко 2
• Светлана Стеценко 2
• Стас Стеценко 2
• Станислав Стеценко 2
• Славик Стеценко 2
• Слава Стеценко 2
9023 9023 Сергий Стеценко 2
• 9023 Сергей Стеценко 2
• Сергей Стеценко 2
Сергей Стеценко 2
• Сергей Стеценко 2
• Сергей Стеценко 2
• Саша Стеценко 2
• Саня Стеценко 2
• Руслан Стеценко 2
• Руслана Стеценко 2
• Рома Стеценко 2
• Роман Стеценко 2
• Пола Стеценко 2
• Пола Стеценко 2
• Павел Стеценко 2
• Павел Стеценко 2
• Паша Стеценко 2
• Оксана Стеценко 2
• Оля Стеценко 2
• Александр Стеценко 2
• Олеся Стеценко Олеся Стеценко 2 2
Стеценко Олеся Стеценко 2
• Стеценко Оксана 2
• Нина Стеценко 2
• Николай Стеценко 2
• Никита Стеценко 2
• Ника Стеценко 2
• Наталья Стеценко 2
• Наталья Стеценко 2
• Наталия Стеценко 2
• Наталья Стеценко 2
• Натали
• Наталья Стеценко 2
• Натали Настя Стеценко 2
• Настенька Стеценко 2
• Надежда Стеценко 2
• Надежда Стеценко 2
• Михаил Стеценко 2
• Миша Стеценко 2
• Михаил Стеценко 2
• Михаил Стеценко 2
• Михаил Стеценко 2
• Михаил Стеценко 2
• Майк Стеценко 2
9023 Максим Стеценко 2
• Маша Стеценко 2
• Марина Стеценко 2
• Марьяна Стеценко 2
• Маркелл Стеценко 2
• Мария Стеценко 2
• Мариша Стеценко 2
• 9023 Марина Стеценко 2
• 9023 Марина Стеценко 2
• 9023 Марина Стеценко Малек Стеценко 2
• Максим Стеценко 2
• Людмила Стеценко 2
• Люба Стеценко 2
• Лилия Стеценко 2
• Леся Стеценко 2
• Леонид Стеценко 2
• Лена Стеценко 2
9023 Ксяценко 2 9023 Стеценко 2 Стеценко 2
• Ксения Стеценко 2
• Ксана Стеценко 2
• Кристина Стеценко 2
• Костя Стеценко 2
• Константин Стеценко 2
• Коля Стеценко 2
Кирилла
• Стеценко 2
• 2
Кирилла
• Стеценко 2
• Карина Стеценко 2
• Юлия Стеценко 2
• Иван Стеценко 2
• Иванна Стеценко 2
• Юрий Стеценко 2
• Ирина Стеценко 2
• 9023 Иришка Стеценко 2
• Иришка 2 9023 Стеценко 2
• Гриша Стеценко 2
• Григорий Стеценко 2
• Григорий Стеценко 2
• Георгий Стеценко 2
• Гарик Стеценко 2
• Галина Стеценко 2
• Гал Стеценко 2
• Федор Стеценко 2
Стеценко Евангелист 2
• Евангелист Стеценко 2
• Евгений Стеценко 2
• Елизавета Стеценко 2
• Елена Стеценко 2
• Екатерина Стеценко 2
• Егор Стеценко 2
• Дмитрий Стеценко 2
• Дмитрий Стеценко 2
• Денис Стеценко 2
• Денис Стеценко 2
9023
• Даша Стеценко 2
• Дарья Стеценко 2
• Дарина Стеценко 2
• Дарья Стеценко 2
• Данни Стеценко 2
• Данил Стеценко 2
• Даниэль Стеценко 2
• Стеценко 2
• Даниэль Стеценко 2
• Стеценко Артем 2
• Аня Стеценко 2
• Антон Стеценко 2
• Антонина Стеценко 2
• Анна Стеценко 2
• Анна Стеценко 2
• Андрей Стеценко 2
• Андрей Стеценко 2
Стеценко Андрей 2 Анастасия Стеценко 2
• Анастасия Стеценко 2
• Анастасия Стеценко 2
• Алена Стеценко 2
• Алена Стеценко 2
• Алла Стеценко 2
• Алинка Стеценко 2
Алекс Стеценко 2
• Алекс Стеценко 2
• Алекс Стеценко 2
• Алекс Стеценко 2
• Алекс Стеценко 2
• Алекс Стеценко 2
• Александр Стеценко 2
• Александра Стеценко 2
• Александр Стеценко 2
• Алена Стеценко 2
• Алексей Стеценко 2
• Александр Стеценко 2
• Александра Стеценко 2
• Ада Стеценко 2
• Ада Стеценко 2
• Ада
• Юля Стеценко
• Юлия Стеценко
• Евгенией Стеценко
• Ярик Стеценко
• Ядвига Стеценко
• Xseneia Стеценко
• Wlad Стеценко
• Wjtcheslav Стеценко
• Всеволод Стеценко
• Вовчик Стеценко
• Вова Стеценко
• Володя Стеценко
• Влас Стеценко
• Vladivir Стеценко
• Владик Стеценко
• Виталик Стеценко
• Vitalij Стеценко
• Viky Стеценко
• Viktoriia Стеценко
• Виктор Стеценко
• Вячеслав Стеценко
• Валюша Стеценко
• Валя Стеценко
• Вал Стеценко
• Валерий Стеценко
• Валерий Стеценко
• Валерия Стеценко
• Валерий Стеценко
• Валентин Стеценко
• Валентин Стеценко
• Валенина Стеценко
• Вадим Стеценко 9 0237
• Vadon Стеценко
• Ульян Стеценко
• Ула Стеценко
• Владимир Стеценко
• Tolyanchik Стеценко
• Тимофей Стеценко
• Тетяна Стеценко
• Testovy Стеценко
• Темок Стеценко
• Тёма Стеценко
• Таисии Стеценко
• Святослав Стеценко
• Svetik Стеценко
• Sveta Стеценко
• Stefy Стеценко
• Стефания Стеценко
• София Стеценко
• Simon Стеценко
• Шушаник Стеценко
• Сергей Стеценко
• Serge Стеценко
• Serega Стеценко
• Ростислав Стеценко
• Rika Стеценко
• Павел Стеценко
• Патрисия Стеценко
• Олеся Стеценко
• Алексей Стеценко
• Олег Стеценко
• Ник Стеценко
• Неля Стеценко
• Назар Стеценко 9023 7
• Нат Стеценко
• Наталка Стеценко
• Натали Стеценко
• Надь Стеценко
• Надия Стеценко
• Надина Стеценко
• Nadezgda Стеценко
• Николая Стеценко
• Mykhayl Стеценко
• Михайло Стеценко
• Mladena Стеценко
• Милана Стеценко
• Михайло Стеценко
• Mia Стеценко
• Майя Стеценко
• Максимилиан Стеценко
• Мэри Стеценко
• Марк Стаценко
• Марьяна Стеценко
• Mari Стеценко
• Маргарита Стеценко
• Макар Стеценко
• Maichka Стеценко
• Ляля Стеценко
• Людмила Стеценко
• Любовь Стеценко
• Лиза Стеценко
• Людмила Стеценко
• Люда Стеценко
• Лиля Стеценко
• Лилиана Стеценко
• Лилия Стеценко
36 Лилиана Стеценко
• Lidusya Стеценко
• Лидия Стеценко
• Лесе Стеценко
• Лерчика Стеценко
• Ленусика Стеценко
• Леночки Стеценко
• Larysa Стеценко
• Ларисы Стеценко
• Лары Стеценко
• Lapochka Стеценко
• Кирил Стеценко
• Ксюше Стеценко
• Kostiantyn Стеценко
• Katy Стеценко
• Катя Стеценко
• Камила Стеценко
• Кадри Стеценко
• Juliya Стеценко
• Юлиана Стеценко
• John Стеценко
• Йохан Стеценко
• Jekaterina Стеценко
• Jeka Стеценко
• Жанна Стеценко
• Джейн Стеценко
• Яна Стеценко
• Федор Стеценко
• Фаина Стеценко
• Евгений Стеценко
• Евгения Стеценко
• Ева Стеценко
• Евгенио Стеценко
• Elina Стеценко
• Elela Стеценко
• Дмитрий Стеценко
• Дмитро Стеценко
• Dimon Стеценко
• Димка Стеценко
• Диди Стеценко
• Diana Стеценко
• Den Стеценко
• День Стеценко
• Давид Стеценко
• Дария Стеценко
• Danilfifa Стеценко
• Даниил Стеценко
• Кристина Стеценко
• Екатерина Стеценко
• Caterina Стеценко
• Bohdana Стеценко
• Astetwot Стеценко
• Эшли Стеценко
• Арсен Стеценко
• Арина Стеценко
• Anyuta Стеценко
• Anuta Стеценко
• Анетта Стеценко
• Андрей Стеценко
• Анай Стеценко
• Анастасия Стеценко
• Амина Стеценко
• Аленка Стеценко
• Алиса Стеценко
• Алена Стеценко
• Элин Стеценко
• Alexsandr Стеценко
• Alexsander Стеценко
• Alekc Стеценко
• Алехандро Стеценко
• Albinka Стеценко
• Альбина Стеценко
• Аджа Стеценко

Опечатки & Misspells

stetsekno, settsenko, sttesenko, stetsenk, stetsenkoa, sttettsenko , Стеценко, Стеценко, Стеценкоо, Стеценко

Лучшие изображения для Стеценко

Международная отчетность — A Blogs @ Baruch site

Недавно были опубликованы статьи об ЛГБТ-сообществе Джакарты, Индонезия.Люди начинают обсуждать тему о том, положительно она или отрицательно. По мнению организации «Арус Пеланги», существует дискриминация в отношении ЛГБТ-сообщества. Индонезийская психиатрическая ассоциация также разделена на две части по вопросу о том, является ли ЛГБТ болезнью, которую нужно лечить или нет. Кроме того, идея принятия и интеграции граждан ЛГБТ в повседневную жизнь индонезийцев, будь то в колледже, на работе, в семье, в поездках или в средствах массовой информации. Существует серьезный конфликт между индонезийцами и индонезийцами.ЛГБТ-сообщество.

Спрашивая Понти о его планах на будущее, он сказал: «Ну, мне 29, так что я в том возрасте, когда я все еще решаю:« Должен ли я иметь семью? » Должен ли я иметь ребенка? »В конце концов, если я решу, что собираюсь усыновить ребенка или завести ребенка, то да, я подумаю о том, чтобы уехать куда-нибудь за границу или, по крайней мере, на Бали».

Быть геем и создать семью в будущем кажется недосягаемым, если только человек не покинет Индонезию и не будет искать страну, дружественную к ЛГБТ. Индонезийцы по-прежнему считают, что у однополых пар не должно быть детей и что лучше, если дети будут воспитываться родителями противоположного пола.Это не факт, поскольку такие страны, как США и Канада, приняли ЛГБТ-сообщество; они легализовали усыновление, искусственное оплодотворение и однополые браки.

На следующий день у Аруса Пеланги взяли интервью. Женщина по имени Адженг Картика, член организации, поделилась своей историей: «Я Адженг, я идентифицирую себя как трансгендер. В молодости я чувствовала себя женщиной. Хотя я играл со своими друзьями-парнями, играл в футбол, играл в тэги, и моя семья относилась ко мне как к мальчику. Но я все еще чувствую, что я девушка.Я с раннего возраста чувствую себя девочкой. Хотя ко мне относятся как к мальчику, и я играл со своими друзьями-парнями. Со временем я чувствую, что я женщина. После того, как моя семья узнала об этом, моя семья почувствовала и подумала, что во мне есть ненормальность, поскольку я чувствую себя женщиной. Потом они пытаются записать меня в песантрен. Но после того, как я попал в песантрен, я почувствовал, что подвергся притеснению, например, сексуальным домогательствам и так далее. Я чувствую, что это неправильно, если я продолжаю быть там. Я пыталась рассказать своей семье, что я чувствую, я действительно чувствую, что это правда, что у меня есть пенис, но я чувствую, что я женщина.Я не могу делать это постоянно. С тех пор я никогда не хотел, чтобы со мной обращались как с мужчиной. Я только хотела, чтобы со мной обращались как с женщиной ».

Инес Синтья из Арус Пеланги поделилась своей историей дискриминации, основанной на ее кампусе и опыте трансгендерной женщины в Индонезии: «Дискриминация среди трансгендерного сообщества очень высока. Особенно, когда я нахожусь в кампусе. Присоединяйтесь к обсуждению, мои коллеги-ученые и преподаватели. Когда я вхожу в кампус. Например, они смотрят на нас и удивляются, почему в кампусе живут трансгендеры.Это действительно неудобно. Из-за чего? Колледж — это место, где люди учатся. Но там я получил дискриминацию, что, на мой взгляд, очень разительно. До сих пор я, скорее всего, выбрал стрижку, потому что это облегчает мне вход в кампус. В результате больше нет дискриминации, потому что наша цель — правильно учиться. Во-вторых, когда мы хотим получить доступ к государственной службе. Например, такие, как поездка на поезде, трансгендеры, которые хотят летать в самолете. Когда они входят, чтобы пройти регистрацию или посадку, люди все равно смотрят на нас, как на странных.Ну, вообще-то, когда люди хотят видеть его трансгендером, ну ладно. Вам не нужно смотреть на нас 5 или более 5 минут. На самом деле, это не дает людям чувствовать себя комфортно. Если вы хотите увидеть чье-то выражение лица, вы можете просто взглянуть на него одним взглядом. Но иногда, когда они видят трансгендера, они действительно рассматривают нас сверху вниз. Так что существует много дискриминации по отношению к сообществу трансгендеров ».

Юли Рустинавати, лидер «Арус Пеланги» и защитник ЛГБТ, заявила: «Индонезия просто рассматривает это как разный пол, женщину и мужчину.Пока вопрос о гендерной идентичности не может быть включен. Это становится проблемой для трансгендерного сообщества. Где их более 60%. Специально для трансгендерной женщины с высокой подвижностью. Из одного региона в другой. Кроме того, теперь они подвергаются домашнему насилию со стороны своей семьи. После того, как они видят, что их пол совсем другой. Кроме того, в школе есть насилие, трансгендеры не могут получать удовольствие или продолжать учебу в школе. Когда их гендерное выражение отличается от пола, в котором они родились.Тогда их семьи не принимают этого, насилия много. Хотят они того или нет, им нужно бежать. Вот как они редко сохраняют документы, удостоверяющие личность, или свидетельства о рождении, теперь это тоже становится проблемой. После окончания колледжа Арус Пеланги — моя работа, я стал защитником ЛГБТ. Таким образом, вам не нужно подавать заявление о приеме на работу. Вот почему я раньше говорил, что я один из самых удачливых людей. Но не в последние два года. В прошлом году с января по июль произошло около 186 инцидентов, начиная с сексуального насилия, увольнения с работы и отчисления.Они разогнали множество ЛГБТ-дискуссий. Виновником также является группа нетерпимых, в том числе страна и СМИ. Что касается увольнения с работы, то у нас нет конкретных данных, так как многие ЛГБТ боятся, потому что это касается их жизни. Последние 10 лет мы продолжаем слышать отчеты нашего сообщества. Они сказали, что меня уволили, потому что я гей, но мы не можем предпринять никаких действий, поскольку те, кто нам докладывает, хотят только рассказать свои истории. Один из случаев, который происходит в Южном Сулавеси, — это компания с ограниченной ответственностью, в которой действует правило, запрещающее людям одеваться в одежду противоположного пола.Мужчина не может одеваться как женщина, женщина не может одеваться как мужчина или другое гендерное выражение, отличное от того, что было предписано с рождения. Человеку не разрешается носить то, что он хотел, во время работы или вне работы. Итак, эти компании начали совершать всю эту дискриминацию в отношении ЛГБТ-сообщества или, возможно, они могут даже не быть ЛГБТ, и это их гендерное выражение. Итак, насилие по отношению к ЛГБТ-сообществу становится более структурным. Структурно по отношению к семье, это домашнее задание, потому что иногда в семье все еще есть насилие.Затем граждане Индонезии, затем страна принимает меры по количеству дискриминационных политик на уровне деревни, района, провинции или национального уровня в Индонезии. По нашим данным на 2013 год, 9 из 10 из нас подвергаются насилию ».

Зоя Амирин, клинический психолог, рассказала о ЛГБТ-сообществе в Индонезии и о том, как люди к нему подходят. Она заявила, что индонезийцы считают трансгендерных людей драматичными и требуют внимания. Когда Зоя пыталась объяснить людям, они все равно не понимали.Она отметила, что быть трансгендером — это не выбор, и что разговаривать с людьми, пытаться объяснить это, по ее словам, — это «чертовски трудная работа». Она пыталась взглянуть на них с их точки зрения и на то, что люди на самом деле не учатся обрабатывать свои чувства. Если кто-то выступает как гей или лесбиянка, его семье и друзьям трудно это принять. И люди действительно думают, что бисексуалы — это переодетые геи. Она также упомянула, что как люди, которые выходят, так и их родители, семья или друзья, с трудом справляются со своими чувствами.Зоя сказала: «Они все те же люди, которые родились и стали членами семьи, но большинство людей, с которыми я беседовала и находились на моей кушетке для психологов, они просто сказали:« Я чувствую, что терплю неудачу как родитель, когда у меня есть дети, которые на самом деле лесбиянки или геи ». В средствах массовой информации Зоя объяснила, что на индонезийском телевидении трансгендерная принадлежность также менее принята сейчас, после появления ЛГБТ-движения. СМИ посчитали, что на телевидении слишком много свободы. Она считает, что это противоречит правам человека, и люди просто ведут себя соответствующим образом, чтобы сохранить свою работу на телевидении.Она сказала, что у нее всего лишь «один голос», и большинство людей не хотят слишком сильно выступать против этого, потому что вы становитесь меньшинством. Если вы не причастны к чему-то важному, если вы всего лишь меньшинство, сообщение кажется, что вам лучше быть спокойным.

Структурная основа протонно-управляемого транспорта цинка с помощью ZntB

Экспрессия белка и подготовка мембранных везикул

Экспрессию ZntB проводили в 5-литровой колбе, содержащей 2 л среды LB (10 г / л ^-1 Бакто триптон, 5 г л ^-1 экстракт дрожжей бакто, 10 г л ^-1 NaCl), с добавлением 50 мкг мл ^-1 канамицина и 34 мкг мл ^-1 хлорамфеникола.Клетки E. coli BL-21 (DE3) с pNIC_BSA4_ZntB (pNIC28-Bsa4 был подарком от Opher Gileadi (плазмида Addgene № 26103) ³⁷ ) выращивали при 37 ° C, 200 об / мин. с OD ₆₀₀ 0,8 с индукцией добавлением 0,1 мМ IPTG. После 3 ч экспрессии клетки собирали центрифугированием (15 мин, 7446 × г, , 4 ° C), промывали в буфере A (50 мМ Трис / HCl, pH 8,0) и ресуспендировали в буфере B (50 мМ Трис / HCl, pH 8,0, 150 мМ NaCl, 10 мМ имидазол, 10% глицерин).Сразу готовили мембранные везикулы или, альтернативно, ресуспендированные клетки мгновенно замораживали в жидком азоте и хранили при -80 ° C.

MgSO ₄ 1 мМ и 50–100 мкг мл ^-1 ДНКазы добавляли к клеткам перед приготовлением мембранных везикул. Затем клетки разрушали и лизировали под высоким давлением (Constant Cell Disruption System Ltd., Великобритания, два пассажира при 25 кПси, 5 ° C), остатки клеток удаляли низкоскоростным центрифугированием (30 мин, 12074 × г ). , 4 ° C), и мембранные везикулы собирали ультрацентрифугированием (120 мин, 193,727 × г, , 4 ° C).После этого собранные мембранные везикулы ресуспендировали в буфере C (50 мМ Трис / HCl, pH 8,0, 150 мМ NaCl, 15% глицерин) до конечного объема 5 мл на 1 литр клеточной культуры. Затем аликвоты мембранных везикул быстро замораживали в жидком азоте и хранили при -80 ° C. Анализ протеина Брэдфорда (Bio-Rad) использовали для определения общей концентрации белка в приготовленных мембранных везикулах.

Очистка белка

Приготовленные мембранные везикулы быстро размораживали и немедленно растворяли в буфере D (50 мМ Трис / HCl, pH 8.0,150 мМ NaCl, 10 мМ имидазол, 10% глицерин, 1% (мас. / Об.) n -додецил-β-d-мальтопиранозид (DDM, Anatrace)) при 4 ° C в течение 1 ч при легком покачивании. Для удаления нерастворимого материала применяли стадию центрифугирования (30 мин, 442907 × г, , 4 ° C). После этого супернатант инкубировали в течение 1 ч со смолой Ni ²⁺ -сефарозы (объем колонки 0,5 мл) при 4 ° C, предварительно уравновешенной 20 CV буфера E (50 мМ Трис / HCl, pH 8,0, 150 мМ NaCl, 15 мМ имидазол, 0,03% ДДМ). Затем собирали поток после того, как суспензию вылили в одноразовую колонку объемом 10 мл (Bio-Rad).Материал колонки промывали 10 мл буфера E. ZntB элюировали тремя фракциями буфера F (50 мМ Трис / HCl, pH 8,0, 250 мМ NaCl, 500 мМ имидазол, 0,03% (мас. / Об.) DDM) 200 мкл. , 750 и 500 мкл соответственно. Вторую фракцию элюирования обрабатывали 2 мМ EDTA для удаления совместно элюированных ионов Ni ²⁺ и любого остаточного цинка. Позже вторую фракцию элюирования подвергали эксклюзионной хроматографии с использованием гель-фильтрационной колонки Superdex 200 10/300 (GE-Healthcare), предварительно уравновешенной буфером G (50 мМ Трис / HCl, pH 8.0, 250 мМ NaCl, 0,03% (мас. / Об.) ДДМ). Содержащие очищенные фракции объединяли и использовали непосредственно для восстановления протеолипосом или концентрировали с использованием концентрирующего устройства Vivaspin 500 с отсечкой молекулярной массы 100 кДа (Sartorius stedim) до конечной концентрации 3–6 мг / мл ^-1 с или без добавления 1 мМ ЭДТА при приготовлении для Cryo-EM.

Восстановление в протеолипосомы

Восстановление в протеолипосомах выполняли следующим образом (см. ³⁸ для деталей): полярные липиды E. coli и яичный фосфатидилхолин (в соотношении 3: 1 (вес / вес)) растворяли в хлороформе, затем сушили в роторном испарителе и затем ресуспендировали в буфере, содержащем 50 мМ KPi , pH 7,5 до концентрации 20 мг / мл ^-1 . После трех циклов замораживания-оттаивания были получены большие однослойные везикулы (LUV), которые хранили в жидком азоте. Для приготовления протеолипосом LUV экструдировали через поликарбонатный фильтр диаметром 400 нм (Avestin, 11 пассажей).Полученные липосомы разбавляли до 4 мг / мл ^-1 в буфере H (50 мМ HEPES, pH 7,5) или буфере I (50 мМ HEPES, pH 6,5) и затем дестабилизировали выше R . _сидел с Triton X-100. Очищенный ZntB добавляли к липосомам в массовом соотношении 1: 250 (белок / липид) с последующим удалением детергента с помощью биогранул (50 мг / мл ^-1 , четыре раза через 0,5 часа, 1 час, 2 часа и инкубация в течение ночи). После этого протеолипосомы собирали центрифугированием (25 мин, 285775 × г, , 4 ° C) и ресуспендировали в буфере H или буфере I до концентрации липидов 10 мг / мл ^-1 .Наконец, после трех циклов замораживания-оттаивания полученные протеолипосомы хранили в жидком азоте до последующих экспериментов.

Радиоактивно меченый

⁶⁵ Zn ²⁺ Транспортный анализ

Для использования в транспортном анализе протеолипосомы с желаемым pH размораживали и экструдировали через поликарбонатный фильтр с размером пор 400 нм (Avestin, девять пассажей). Затем к образцу белка добавляли две активные единицы ProTev Plus (Promega) и инкубировали в течение ночи. Протеолипосомы разбавляли в 10 раз до конечного объема 2 мл в том же буфере.После стадии центрифугирования (25 мин, 285775 × g , 4 ° C) протеолипосомы ресуспендировали в буфере H или I до конечной концентрации 0,5 мкг ul ^-1 ZntB. Для каждой временной точки в анализах транспорта реакционный объем 200 мкл буфера (с желаемым pH) с добавлением 22 мкМ ⁶⁵ ZnCl ₂ инкубировали при 30 ° C при перемешивании. Транспорт был инициирован добавлением 1 мкг ZntB, предварительно восстановленного в протеолипосомах. Стоп-буфер объемом 2 мл (ледяной внешний буфер) добавляли в указанный момент времени, и реакционную смесь быстро фильтровали через нитроцеллюлозный фильтр ВА-85.После промывания фильтра еще 2 мл стоп-буфера определяли уровни радиоактивности с использованием гамма-счетчика Packard Cobra II 5010.

Анализ флуоресцентного транспорта

Транспорт цинка измеряли с помощью Zn ²⁺ -чувствительного флуорофора FluoZin-1 (ThermoFisher, США). Чтобы избежать обесцвечивания флуорофора, образец был максимально защищен от прямого света. FluoZin-1 (исходная концентрация 3 мМ в H ₂ O) добавляли до конечной концентрации 5 мкМ к протеолипосомам с желаемым pH.Инкапсуляцию FluoZin-1 проводили с помощью трех циклов замораживания-оттаивания и последующей экструзии через поликарбонатные фильтры 0,4 мкм. Экстравезикулярный краситель удаляли из ~ 500 мкл суспензии липосом с помощью эксклюзионной хроматографии на колонке с 2 мл Sephadex G-75, уравновешенной буфером H или I. Протеолипосомы собирали ультрацентрифугированием (25 мин, 285775 × g , 4 ° C) , и супернатант был удален. Протеолипосомы ресуспендировали с 10 мкл буфера H или I на 2,5 мг протеолипосом (соотношение белков к липидам 1: 250).Анализы переноса с протонным градиентом или без него инициировали добавлением 10 мМ исходного раствора ацетата цинка до желаемой конечной концентрации. Для каждого измерения 0,3 мг протеолипосом (соотношение белков к липидам 1: 250) разводили в 1 мл желаемого буфера. Динамику флуоресценции измеряли в кювете на 1 мл с мешалкой, используя длину волны возбуждения 490 нм и длину волны излучения 525 нм. Параллельно проводили эксперименты с пустыми липосомами в качестве контролей. Начальные скорости переноса (ΔF s ^-1 ) рассчитывали путем выполнения линейной регрессии данных переноса между 1 и 10 с после добавления ацетата цинка.Полученные данные были подогнаны к уравнению Михаэлиса-Ментен. Все измерения проводились как минимум трижды.

Для анализов транспорта H ⁺ люменальный буфер протеолипосом заменяли на буфер J (5 мМ HEPES pH 6,7) путем ресуспендирования липосом в этом буфере с последующими тремя циклами замораживания-оттаивания и экструзией через поликарбонат 0,4 мкм. фильтры. Протеолипосомы собирали ультрацентрифугированием (25 мин, 285,775 × г, , 4 ° C), и супернатант удалялся.Протеолипосомы ресуспендировали с 10 мкл буфера J на ​​2,5 мг протеолипосом (соотношение белков к липидам 1: 250). Для каждого измерения 0,3 мг протеолипосом разводили в 1 мл буфера К (5 мМ HEPES, pH 6,7, 150 нМ ACMA). Динамику флуоресценции измеряли в кювете на 1 мл с мешалкой, используя длину волны возбуждения 419 нм и длину волны испускания 483 нм; цинк добавляли через 3 мин времени уравновешивания. Параллельно проводили эксперименты с пустыми липосомами в качестве контролей.Все измерения повторяли трижды.

Изотермическая калориметрия титрования

Прибор ITC200 (MicroCal) использовался для выполнения всех экспериментов ITC. Термически уравновешенная ячейка ITC заполнялась 280 мкл ZntB в буфере G (10–15 мкМ) и исследуемые субстраты (в том же буфере) титровались в ячейку. Температура была зафиксирована на уровне 25 ° C. Анализ данных проводился с использованием программного обеспечения на основе происхождения, предоставленного MicroCal.

Криоэлектронная микроскопия одиночных частиц

Очищенный образец ZntB доводили до конечной концентрации ~ 10 мг / мл ^-1 .Аликвоты по 3 мкл наносили на свежевыгруженные дырявые углеродные решетки (Quantifoil Au R1.2 / 1.3, 300 меш), избыток жидкости промокали в течение 4–5 с с использованием FEI Vitrobot Mark IV, и образец погружали в замороженном виде в жидкий этан при температуре около 100 К. Сетки ПЭМ переносили в микроскоп Titan Krios 300 кэВ (FEI, Нидерланды), оборудованный детектором прямых электронов К2. Изображения с нулевыми потерями были записаны полуавтоматически с использованием сценария UCSF Image4 ³⁹ . Энергетический фильтр GIF-квантов был настроен на ширину щели 20 эВ.Изображения были собраны при номинальном увеличении × 81000 (что дает размер пикселя 1,43 Å) и диапазоне расфокусировки от -1,5 до -3,0 мкм. Всего было собрано 2655 видеоизображений с 24 кадрами, фракционированными по дозе за 18 с, в режиме подсчета сверхвысокого разрешения.

Движение, вызванное лучом в необработанных кадрах фильма, было скорректировано с использованием коррекции движения всего кадра с помощью MOTIONCORR 1.0 ⁴⁰ с последующей оценкой функции передачи контраста (CTF) с использованием gctf ⁴¹ . Все последующие этапы обработки данных выполнялись с помощью RELION 2.0 программный пакет ⁴² . Ссылки для отбора частиц на основе шаблона были получены из двумерных (2D) классов, полученных из вручную выбранных частиц из подмножества микрофотографий. Первоначальный запуск алгоритма на основе шаблонов выбрал 1 миллион частиц из всех 2655 изображений. Чтобы уменьшить количество ложноположительных выборок частиц при первоначальном выборе частиц на основе шаблона, к полному извлеченному набору данных было применено несколько раундов 2D-классификации, в результате чего получилось подмножество из 333 490 проекций частиц.Полученные частицы были подвергнуты трехмерному автоматическому уточнению, коррекции движения на основе частиц и взвешиванию на основе повреждений отдельных кадров ⁴³ . Для этих «полированных» частиц был проведен дополнительный цикл 2D-классификации, чтобы исключить ложноположительные или некачественные частицы. Полученная карта была использована для ручного построения модели в Coot ⁴⁴ с использованием ранее опубликованной структуры CorA (pdb id: 4I0U) в качестве эталонной модели. Уточнение было выполнено в Phenix ⁴⁵ с окончательной проверкой в ​​Molprobity ⁴⁶ .Модель EcZntB «без Zn ²⁺ » и модель StZntB «без Zn ²⁺ » были получены путем переноса последовательности EcZntB в модель StZntB с помощью сервера Phyre2 ⁴⁷ . Электростатические потенциалы были рассчитаны с помощью APBS ⁴⁸ после начальной подготовки файлов на сервере PDB2PQR ⁴⁹ . Изображения были подготовлены с помощью версии PyMol с открытым исходным кодом (https://sourceforge.net/projects/pymol/).

Доступность данных

Координаты атомов и соответствующая карта плотности электронной микроскопии депонированы в банке данных белков и банке данных электронной микроскопии под номером доступа 5N9Y и EMD-3605, соответственно.Другие данные доступны у соответствующих авторов по разумному запросу.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

---

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

• В вашем браузере отключены файлы cookie.Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить, хотите ли вы принимать файлы cookie.
• Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
• Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
• Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie.Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
• Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

---

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

---

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.